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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012凍存方案

大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012凍存方案

更新時間:2021-07-13點擊次數(shù):285

以下實驗方案介紹了大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012培養(yǎng)細(xì)抱胞六存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具依細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。

細(xì)胞3.jpg


1.配制」存培養(yǎng)基,于2C至8°C下儲存,夏至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于用細(xì)系。


2凍存貼壁細(xì)抱胞,利用傳代時所月方法輕柔地使細(xì)胞從廷織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)抱所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。


3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)染法或普使用 Countess(⑤自動細(xì)計數(shù)儀測定總細(xì)態(tài)數(shù)和活細(xì)百分比。根據(jù)所需活細(xì)


4.以大約100-200X9的離心力將細(xì)胞暴液楽心5至10分鐘。在無條件下小心鑰持掉上清液,不要攪動細(xì)抱胞沉定。

注:心速度和時?取決于細(xì)種類


5.月預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新暴浮細(xì)胞沉,將其調(diào)至該細(xì)抱適會的活細(xì)胞密度。凍細(xì)胞,使涅度每分鐘大約降低1C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存?zhèn)}中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

TOP10F′感受態(tài)細(xì)胞(化學(xué)轉(zhuǎn)化法或熱激法)

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