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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程

小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程

更新時(shí)間:2022-10-12點(diǎn)擊次數(shù):452

小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 Interferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)


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