闊盤吸蟲通用PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則：

1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結果更穩(wěn)定。

4、實驗時，要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

9、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。

10、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

為確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性和重復性，實驗人員需嚴格遵守以下補充操作規(guī)范：

11. 反應板孵育階段需使用專用封板膜覆蓋孔口，防止溶液蒸發(fā)及交叉污染。建議在恒溫孵育箱內進行反應，溫度波動范圍控制在±0.5℃以內。若使用水浴孵育，需確保酶標板底部與水浴液面接觸。

12. 洗滌緩沖液使用前需檢查是否有結晶析出，如有沉淀應37℃水浴至溶解。自動洗板機需預先校準洗液注量，手工洗板時應采用"浸泡-傾倒-拍干"三步法，拍板力度需保持均勻，避免液體飛濺導致孔間污染。

13. 終止反應后，應在15分鐘內完成讀數(shù)。如遇特殊情況需延遲檢測，應將反應板避光保存在2-8℃環(huán)境，最長不超過4小時。讀取數(shù)據(jù)前需用無塵紙擦拭板底，消除指紋或液體殘留對光路的影響。

14. 建立標準曲線時，建議采用五點對數(shù)稀釋法，每個濃度點需包含三組平行孔。R2值應≥0.98，否則需重新標定。對于臨界值附近的樣本（Ct值在35-38之間），應進行重復檢測并取平均值。

15. 實驗記錄須包含以下要素：試劑盒批號、儀器校準記錄、環(huán)境溫濕度、異常現(xiàn)象描述等。原始數(shù)據(jù)需經(jīng)第二人復核簽字，電子數(shù)據(jù)應實時備份至云端存儲系統(tǒng)。