人胚肺成纖維細(xì)胞；CCC-HPF-1說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

細(xì)胞名稱            
形態(tài)特性      成纖維細(xì)胞樣        
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)        
特征特性      取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。        
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS        
傳代方法      1:3傳代；3~4天1次。        
傳代情況     P9        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS        
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法（-）        
STR      Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：12；D18S51：13,20；D19S433：14.2,16.2；D21S11：29,32.2；D2S1338：19,20；D3S1358：14,15；D5S818：12,13；D7S820：10；D8S1179：13,14；FGA：21，23；TH01：7，9；TPOX：9,10；vWA：16；        
同工酶            
染色體      46,XY        
使用權(quán)限     A類    
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。PV9 （hydrochloride） （50 mg）1-phenyl-2-（pyrrolidin-1-yl）octan-1-one， monohydrochloride； PV9 （hydrochloride）
1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC （1 g）1，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1，2-DSPC|Coatsome MC 8080|1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； 1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC
2，5-DMMA （5 mg）2，5-dimethoxy-N，α-dimethyl-benzeneethanamine； 2，5-Dimethoxymethamphetamine； 2，5-DMMA
ML-216 （25 mg）N-[4-fluoro-3-（trifluoromethyl）phenyl]-N’-[5-（4-pyridinyl）-1，3，4-thiadiazol-2-yl]-urea； CID-49852229； ML-216
GSK 3787 （10 mg）4-chloro-N-[2-[[5-（trifluoromethyl）-2-pyridinyl]sulfonyl]ethyl]-benzamide； GSK 3787
COX-1 （ovine） Blocking Peptide （200 ug）Cyclooxygenase 1|Prostaglandin H Synthase 1|PGHS-1； COX-1 （ovine） Blocking Peptide
PAH Detector （500 ul）PAH Detector

Cfr13I (Sau96I)規(guī)格：1000 units

Cfr42I (SacII)規(guī)格：1200 units

Cfr42I (SacII)規(guī)格：5x1200 units

Cfr42I (SacII)規(guī)格：2000 units

Csp6I (CviQI)規(guī)格：1500 units

DraI規(guī)格：1500 units

DraI, HC規(guī)格：7500 units

Eam1104I (EarI)規(guī)格：300 units

Eam1104I (EarI)規(guī)格：1500 units

Eam1105I (AhdI)規(guī)格：1000 units

Ecl136II (EcoICRI)規(guī)格：1500 units

EcoO109I (DraII)規(guī)格：2000 units

EcoRI規(guī)格：5000 units

EcoRI規(guī)格：5x5000 units

EcoRI, HC規(guī)格：25000 units

EcoRI規(guī)格：10000 units

Eco24I (BanII)規(guī)格：1500 units

Eco31I (BsaI)規(guī)格：1000 units

Eco31I (BsaI)規(guī)格：5000 units

Eco32I (EcoRV)規(guī)格：2000 units

Eco32I (EcoRV)規(guī)格：5x2000 units

Eco32I (EcoRV), HC規(guī)格：10000 units

Eco32I (EcoRV)規(guī)格：4000 units

Eco47I (AvaII)規(guī)格：800 units