人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞；CCD-1095Sk價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞；CCD-1095Sk價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  此株細(xì)胞從左乳房的活體組織切片的正常皮膚建立。 病人患有乳腺浸潤性導(dǎo)管癌并患有乳頭濕疹樣癌本病。 這一代次的細(xì)胞已經(jīng)過兩次數(shù)目倍增，約可再進(jìn)行10次數(shù)目倍增。  
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(1+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

次(亞)甲基蘭    10g
次黃嘌呤    1g
次甲基綠    1g
D- 阿拉伯糖    10g
D- 氨基半乳糖鹽酸鹽    250mg
D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽    10g
D- 氨基酸氧化酶    5 mg
D- 半乳糖    25g
D- 半乳糖醛酸    1g
D- 泛酸鈣    50g
D- 甘露    250g
D- 甘露糖    5g
D- 果糖    250g
D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽    100mg
D- 果糖 -6- 磷酸二鈉    100mg
D- 海藻糖    5g
D- 核糖    5g9（S）-HODE-d4 （25 ug）9S-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 9（S）-HODE-d4
8（S），15（S）-DiHETE （25 ug）8S，15S-dihydroxy-5Z，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 8（S），15（S）-DiHETE
ω-3 Arachidonic Acid-d8 （5 mg）8Z，11Z，14Z，17Z-eicosatetraenoic-8，9，11，12，14，15，17，18-d8 acid； ω-3 AA-d8； ω-3 Arachidonic Acid-d8
8-Isoprostane Affinity Column （4 ml） （1 ea）8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane Affinity Column （4 ml）
Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate （5 ea）Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate
17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum （100 dtn）Bimatoprost EIA Antiserum； 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum
15（S）-HpEDE （100 ug）15S-hydroperoxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HpEDE
sPLA2 （human Type IIA） EIA Standard （1 ea）Secretory Phospholipase A2 （human synovial）； sPLA2 （human Type IIA） EIA Standard
SEAP Substrate （Luminescence） （15 mL）SEAP Substrate （Luminescence）
TBS Stock Solution （10X， pH 7。4） （1 L）Tris-buffered Saline； TBS Stock Solution （10X， pH 7。4）
2-O-methyl PAF C-16 （50 mg）1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； 2-O-methyl PAF C-16
2-Arachidonyl Glycerol ether （25 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraen-2-glyceryl ether； 2-AG ether|Noladin； 2-Arachidonyl Glycerol ether
Oleyl Trifluoromethyl Ketone （5 mg）1，1，1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one； OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone； Oleyl Trifluoromethyl Ketone
DMSO Assay Reagent （1 ml）DMSO Assay Reagent
D- 棉子糖    10g
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二鈉    1g
D- 山梨    250g
D- 生物素 ( 維生素 H)    1g
D- 無水葡萄糖    250g