人類成纖維細胞系；CNLMG-B5537SKIN價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人類成纖維細胞系；CNLMG-B5537SKIN價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

L- 異亮氨酸    25g
L- 轉鐵蛋白    10mg
L- 組氨酸    25g
L- 組氨酸鹽酸鹽    25g
L-(+) 乳酸鋰鹽    5g
L(+) 鼠李糖    5g
L-15 培養基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )    500mL
Lambda 核酸外切酶    1000U
lambda(λ)DNA    5μg
lambda(λ)DNA    5μg
lambda(λ)DNA    5μg
LAMP 可見光染料    1mL
LAMP 擴增陽性對照    50 次
L-Arginine(NO 前體 )    5gADB-PINACA pentanoic acid metabolite （1 mg）5-（3-（（1-amino-3，3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl）carbamoyl）-1H-indazol-1-yl）pentanoic acid； ADB-PINACA pentanoic acid metabolite
1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE （500 mg）1，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine； 1，2-DSPE|1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphoethanolamine； 1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE
Ilimaquinone （100 ug）3-[[（1R，2S，4aS，8aS）-decahydro-1，2，4a-trimethyl-5-methylene-1-naphthalenyl]methyl]-2-hydroxy-5-methoxy-2，5-cyclohexadiene-1，4-dione； Ilimaquinone
ML-191 （1 mg）5-phenyl-3-（1-（1-（p-tolyl）cyclopropane-1-carbonyl）piperidin-4-yl）-1，3，4-oxadiazol-2（3H）-one； CCG-152883|CID-23612552； ML-191
Ketoconazole （500 mg）1-[4-[4-[[（2R，4S）-2-（2，4-dichlorophenyl）-2-（1H-imidazol-1-ylmethyl）-1，3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]-ethanone； Nizoral|R 4140Ketoconazole
Fluprostenol-d4 （100 ug）9α，11α，15R-trihydroxy-16-（3-（trifluoromethyl）phenoxy）-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； 16-m-trifluoromethylphenoxy tetranor Prostaglandin F2α-d4； Fluprostenol-d4
Fluprostenol Lactone Diol （50 mg）（+）-（3aR，4R，5R，6aS）-hexahydro-5-hydroxy-4-[（1E，3R）-3-hydroxy-4-（3-trifluoromethyl）phenoxy-1-butenyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one； Fluprostenol Lactone Diol
CP 47，497-C9-homolog （1 mg）cis-5-（1，1-dimethylnonyl）-2-（3-hydroxycyclohexyl）-phenol； CP 47，497-C9-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 （5 mg）N-（2-hydroxyethyl-1，1’，2，2’-d4）-octadeca-9Z，12Z，15Z-trienamide； α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
LB 平板培養基 (Amp 抗性 )    10 塊
LB 平板培養基 (Kan 抗性 )    10 塊
LB 平板培養基 (Tet 抗性 )    10 塊
LB 平板培養基 無抗    10 塊
LBA4404 農桿菌感受態細胞    10×100μL