小鼠骨髓瘤細(xì)胞；Fox-NY圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠骨髓瘤細(xì)胞；Fox-NY圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞來自骨髓瘤細(xì)胞系 NS-1；由于次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HPRT、HGPRT）和腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（APRT）缺陷導(dǎo)致該細(xì)胞對腺苷和鳥嘌呤的類似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的條件下，當(dāng)該細(xì)胞作為永生化細(xì)胞與Rb（8.12）易位的雌性小鼠的B細(xì)胞融合時，會產(chǎn)生Ig重鏈基因位點的陽性選擇；Ig重鏈基因的選擇可使雜交瘤細(xì)胞更穩(wěn)定地合成抗體。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  維持細(xì)胞濃度在2×105～1×106 cells/ml之間；2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  50~60
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

胰凝乳蛋白酶，測序25μg
CAS12650-88-3溶菌酶1g
130542-0.1水蛭素溶液，2mg/mL0.1mL
柱式毛發(fā) DNAout50 次
mRNA 提取試劑盒25 次
ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 )50 T
植物 DNAout50 次
Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種1mL
130659-10000三磷酸苷雙磷酸酶10,000 milli U
80206-50兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次
Western 印跡膜抗體清除劑50mL
過氧化氫酶 ( 牛肝 )1g
D- 果糖250g
Zetterqvist 固定液250 mL
CAS9005-67-8吐溫 -60500mL
19-0080-500 F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )500mL
130979-50柱式血清血漿 DNAout50 次
瓊脂糖100g
D/F12 培養(yǎng)基100mL
大提柱式細(xì)菌 RNAout5次
Bst DNA 聚合酶，全長500U
CAS134-58-78- 氮雜鳥嘌呤1Vial小鼠腺毒（ADV）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠遷移率族蛋白B1（HMGB-1）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠4羥基壬烯酸（4-HNE）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人血管內(nèi)皮抑素抗體（ES-Ab）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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