小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIF1D2C8F11圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIF1D2C8F11圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C34
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

大鼠抑制B試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠抑制B試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠抑制B試劑盒、大鼠抑制Beisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、大鼠瘤壞死相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人α平滑肌肌動(dòng)試劑盒、人α平滑肌肌動(dòng)elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人E選擇試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人E選擇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人E選擇試劑盒、人E選擇elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原試劑盒、人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人鼠嗜粒細(xì)胞趨化試劑盒、人鼠嗜粒細(xì)胞趨化elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人聚試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人聚試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人聚試劑盒、人聚elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
人胃泌釋放多試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人胃泌釋放多試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人胃泌釋放多試劑盒、人胃泌釋放多elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。100g        三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽
10mL        Sephacryl S-400 基質(zhì)
脂肪酶    5g    CAS9001-62-1
胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液，20mg/mL    1mL    100539-1
50 次        柱式酵母 DNAout
1000U        MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)
10mg        apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白
250mL        非凍型組織 DNA 保存液
1mL        BL21-CodonPlus-RIL 菌種
堿性磷酸酶，大腸桿菌    25U    120405-25
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒    10 次    130308-10
1mL        WB600 枯草宿主菌菌種
25g        過硫酸銨
25g        十六烷基*基溴化銨
250 mL        4% 多聚甲醛
胰蛋白酶抑制劑    100m    CAS9035-81-8
DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖，含 10% 胎牛血清 )    100mL    19-0040-100
RNA 長效保存液    1.5mL    3100-1.5