大額牛腎細胞；BFR-K1價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

大額牛腎細胞；BFR-K1價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一雄性新生大額牛的腎組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。 
培養條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權限 B類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

大鼠氣管平滑肌細胞*培養基    100mL            
沙氏BHI瓊脂/沙氏腦心浸液瓊脂/Sabouraud BHI Agar    真菌檢測    國產/進口    250克    
TSCCa(人舌鱗細胞)    5×106cells/瓶×2            
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞)    5×106cells/瓶×2            
CCDA基礎/彎曲桿菌培養基基礎/炭孢哌酮脫氧膽酸鹽瓊脂基礎/CCDA Base    彎曲桿菌的分離培養    國產/進口    250克    
THP-1(人髓系白血病單核細胞)    5×106cells/瓶×2            
敘利亞倉鼠腎細胞    英文名稱：        BHK    
碳酸氫鈉瓊脂基礎    炭疽桿菌的莢膜培養    國產/進口    250克    
TBST    500ml        國產    
SK-N-MC(人神經上瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
PVDF膜（0.45um）    26.5cm × 3.75m,12cm x 20cm    gersion    12cm x 20cm    
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)    5×106cells/瓶×2            
mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞        gersion        
PC-3(人前列腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
Hut-102(人膚T淋巴瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
Caco-2(人結直腸腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
EL4(小鼠淋巴瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠腎動脈內細胞*培養基    100mL  20 次    一站式 GST 標記蛋白質微量純化套裝    
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )    23-0510-10    10g
柱式醬油 DNAout    130956-10    10 次
10mL    RNA 洗脫液    
100 次    草桿 PCR Mix 4    
1g    硫酸新干粉    
50mL    即用型封堵液 (Nylon )    
Caspase 6 檢測試劑盒     140641-50    50 次
DNA 洗脫液    70705-50    50mL
20 次    Southern Marker DL2000( 生物素 )    
10mg    DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )    
10 次    預染蛋白質電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)    
1mL    Tuner(DE3)plysS 種    
3'-RACE 試劑盒    101104-10    10 次
超快非醇核酸沉淀劑    60402-30    30 次
25 次    雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-FITC·PI）    
100mL    大腸桿零誘導培養基    
10mL    TE 緩沖液，PH7.0    
1mL    酵母蛋白酶抑制劑