非洲綠猴腎細胞；CV-1說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 非洲綠猴腎細胞；CV-1說明書
形態特性  成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  CV-1細胞株源自成年雄性非洲綠猴的腎，用于Rous肉瘤病毒的轉染研究。  
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

EBV-轉化人淋巴細胞（彝族）    英文名稱：        KM9304    
小鼠腺上細胞*培養基    100mL            
Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒    規格：        100次以上    
小鼠艾氏腹水細胞    英文名稱：        EAC    
3% NaC1V-P半固體發酵管    BR    國產/進口    20支    
人腎足突細胞*培養基    100mL            
Mtsb肉湯/改良胰蛋白胨大豆肉湯/改良胰酪胨大豆肉湯/改良胰酶大豆湯/Mtsb Broth With Novobiocin/Modified Tryptic Soy Broth    大腸桿菌O157選擇性增菌    國產/進口    250克    
人結腸長春新堿耐藥株    英文名稱：        HCT-8/V     
疊氮鈉葡萄糖肉湯/Azide Dextrose Broth    鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養    國產/進口    250克    
考馬斯亮藍R-250    10g        國產    
濾膜腸球菌瓊脂/M-腸球菌瓊脂/M-Enerococcus Agar    用于濾膜法或直接平板法，從自來水、食品或其他標本中分離腸球菌    國產/進口    250克    
大鼠氣管上細胞*培養基    100mL            
沙氏1%葡萄糖瓊脂培養基/Sabouraud,s 1% Dextrose Agar    上培養增菌的標準培養基，用于深淺部真菌的分離培養    國產/進口    250克    
TT(人甲狀腺導管細胞)    5×106cells/瓶×2            
WPMY-1(人正常前列腺基質永生化細胞)    5×106cells/瓶×2            
293ET(人胚腎細胞（SV40T和EBNA1基因修飾細胞）)    5×106cells/瓶×2            
大鼠淋巴管內細胞*培養基    100mL            
H4-IIE(大鼠肝細胞 )    5×106cells/瓶×2            
梭菌培養基/Reinfored Medium For Clostridia    用于梭菌檢查    國產/進口    250克    
Tca-8113(人舌鱗細胞)    5×106cells/瓶×2            
SNU-5(人胃細胞)    5×106cells/瓶×2   生物素化的牛血清白蛋白    131094-25    25mg
Real-Time PCR 稀釋液    130816-1    1mL
1mg    U0126(MEK1/2 抑制劑 )    
250mL    非蛋白型 Western 封堵液    
125mg    博萊    
30μg    φX174RF Ⅱ DNA    
L- 精氨    CAS1119-34-2    25g
質粒 ( 載體 ) 系列產品    60908-2    2μg
500mg    硝苯吡啶    
250mL    固相 RNase 清除劑    
250g    聚乙二醇 12000    
50 次    酵母 DNAout    
腐胺    CAS110-60-1    5g
SG1117 種    12-251    1mL
5次    一步法96 孔板單落質粒DNAout( 離心法)    
100g    肌醇    
5mg    氨基喋呤    
100 次    蛋白折疊試劑盒    
羥基脲    CAS127-07-1    1g