名稱    DT40 (雞淋巴瘤細胞)
別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40

年齡（性別） 1日齡

組織來源 法氏囊，淋巴瘤

生長特性 懸浮細胞

細胞形態 淋巴母細胞樣

背景描述 DT40細胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細胞株經鳥類白血病病毒誘導建株的細胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到，法氏囊中生成的腫瘤制成細胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經過一次體內移植后，建立了DT40細胞。DT40細胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達的c-myc RNA水平較高。DT40細胞缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV去調控的myc基因。DT40細胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細胞中都能誘導組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達。v-rel誘導的MHCⅡ表達比c-rel誘導快，且其有效性在數周后達到c-rel的50倍。DT40細胞呈淋巴母細胞表型；傳染性檢測表明，DT40細胞釋放低水平的傳染性RAV-1，DT40細胞株可以用于穩轉研究。

生物安全等級 1

生長培養基 DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% Tryptose Phosphate Broth＋5% Chicken Serum＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~48 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

保藏機構 ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636
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細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

反曲毛殼   嬰兒雙歧桿菌  乳制品發酵；食品飲料；模式菌株．厭氧

河流弧菌   普通變形桿菌

玫瑰紅表面培養基60mm/25cm2   光滑念珠菌KTCC0001凍干粉

丁醇梭菌(丁醇桿菌)   抗輻射鏈霉菌

蠟蚧輪枝孢菌   香蕉炭疽盤長孢菌
大鼠白介素7受體(IL-7R)elisa分析檢測試劑盒

大鼠白介素7(IL-7)elisa分析檢測試劑盒

大鼠白介素6受體(IL-6R)elisa分析檢測試劑盒

大鼠白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒

大鼠白介素5(IL-5)elisa分析檢測試劑盒
DT40 (雞淋巴瘤細胞)蛋白上樣緩沖液非還原，5× 10ml

蛋白上樣緩沖液還原，5× 10ml

蛋白示蹤上樣緩沖液非還原，5× 5ml

蛋白示蹤上樣緩沖液還原，5× 5ml

蛋白提取/檢測