名稱    BEAS-2B（正常肺上皮細胞）（STR鑒定正確）
別稱 Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B

種屬 人類

年齡（性別） 男性

組織來源 肺；支氣管

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 BEAS-2B細胞是從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出的上皮細胞。這些細胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆，BEAS-2B細胞保留了對血清反應進行鱗關分化的能力，并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。BEAS-2B細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。

生物安全等級 2

生長培養基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:3

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO?，5%

溫度：37℃

致瘤性 No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice

保藏機構 AddexBio; T0007001/26 ATCC; CRL-9609 BCRJ; 0395 CCTCC; GDC0139 ECACC; 95102433 KCB; KCB 200922YJ Kerafast; ENH021-FP NCBI_Iran; C561
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細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL  dCTP 溶液，2.5mM2mL

Zinquin 乙酯5mg  dCTP 溶液，100mM0.5mL

1400W(iNOS 抑制劑 )2mg  DB3.1 感受態細胞10×100μL

5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL  dATP 溶液，2.5mM2mL

Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL  dATP 溶液，100mM0.5mL
羅丹明標記的小鼠抗牛IgG

羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈

PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgM

PE標記的兔抗豚鼠IgM

Cy7標記的兔抗豚鼠IgM
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