我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性、來(lái)源、器官、類(lèi)型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息，我們專(zhuān)業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)，讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱(chēng)    T-47D (乳腺管癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) T-47-D; T47-D; T47D:A; T47D

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 女性，54歲

組織來(lái)源 乳腺；乳房；導(dǎo)管；來(lái)自導(dǎo)管癌肋膜滲出液轉(zhuǎn)移灶

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 T-47細(xì)胞分離自一位54歲乳房侵入性導(dǎo)管癌的女性患者胸水；發(fā)現(xiàn)分化的上皮亞株(T-47D)有細(xì)胞質(zhì)連接和17-β-雌二醇及其他類(lèi)固醇降血鈣素的受體，T-47D細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋0.2U/ml Insulin＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~36-46小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, forms colonies in soft agar.

受體表達(dá)情況 calcitonin, expressed; androgen receptor, expressed; estrogen receptor, expressed; progesterone receptor, expressed; glucocorticoid receptor, positive, expressed; prolactin, expressed; calcitonin; androgen receptor, positive; progesterone receptor, p

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-133 DSMZ; ACC-739 ECACC; 85102201
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
Cycloheximide50mg  CFDA SE ( 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 )5mg

Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒50 次

Decitabine 地西他濱5mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒10 次

Doxorubicin(Adriamycin) 100μL  cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次

Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL  Catechin hydrate( 抗氧化劑 )0.5g
大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠NOGO-A elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠Na-K-ATP酶elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠NAD(P)H脫氫酶(醌)1(NQO1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠M型肌酸激酶(CKM)elisa檢測(cè)試劑盒
T-47D (乳腺管癌細(xì)胞)大鼠Ghrelin受體(Ghsr)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠Ghrelin受體(Ghsr)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠GTP酶 KRas elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠GTP酶 KRas elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。