細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

名稱    SK-BR-3 [SKBR3] (乳腺腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 SK-Br-3; Sk-Br-3; SK BR 03; SKBR-3; SKBr-3; SK-BR3; SKBr3; SkBr3; SKBR3

種屬 人類

年齡（性別） 女性，43歲

組織來源 乳腺；乳房；肋膜滲出液轉移灶

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 SK-BR-3 [SKBR3]細胞是由Trempe·G和Old·L·J于1970年從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。SK-BR-3 [SKBR3]細胞亞顯微結構特征包括微絲和橋粒、肝糖原顆粒、大溶酶體、成束的細胞質纖絲；SK-BR-3 [SKBR3]細胞過表達HER2/c-erb-2基因產物。

生物安全等級 1

生長培養基 McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~48-72小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms poorly differentiated adenocarcinoma.

受體表達情況 Blood Type A; Rh+; HLA A11, Bw22 (+/-), B40, B18

注意事項 1. SK-BR-3細胞從冷凍保存中恢復的速度可能很慢。SK-BR-3細胞在低溫保存恢復過程中的附著會很輕。這很正常。這種細胞系在培養的整個第一周以及每次繼代培養后都表現出松散的附著和漂浮的細胞，這并不少見； 2. 如果存在大量漂浮物，尤其是在生長的第一周，在啟動復蘇后幾天內保持細胞不受干擾。如果仍然有很多漂浮物，用臺盼藍檢查生存能力。通過輕輕離心保留漂浮細胞，并在更換培養基時將其與附著的細胞一起添加回同一培養容器中，這一點很重要。不要分離或丟棄漂浮細胞。細胞最初以小斑塊或細胞群的形式附著，許多細胞團仍處于懸浮狀態。幾天后，生長將從貼壁細胞群向外延伸。通常也會出現一些細胞碎片。漂浮細胞應始終通過溫和離心（125 x g，持續5至7分鐘）保留，并在換液或傳代后放回培養容器； 3. SK-BR-3細胞傾向于相互堆積。在細胞達到70-80%匯合度之前不要用消化處理細胞。如果讓細胞過度生長，細胞就會分離漂浮。

保藏機構 ATCC; HTB-30 DSMZ; ACC-736

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CD73抗體

神經細胞粘附分子CALL抗體

6型膠原蛋白α5抗體

接觸蛋白相關蛋白4抗體

CD24抗體
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大鼠γ-半合成酶(γ-GCS)elisa檢測試劑盒

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