人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

Rabbit Anti-human IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM規(guī)格: 0.1ml

IRS1  胰島素受體底物-1抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-IKKi/IKKe(Ser172)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體規(guī)格: 0.1ml

TRPM6  瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體（M亞家族）規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG規(guī)格: 1mg

CNOT2  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA規(guī)格: 0.1ml

phospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘著斑激酶抗體規(guī)格: 0.1ml

GRASP65  高爾基體外周膜蛋白p65抗體規(guī)格: 0.2ml

PTN/Pleiotrophin  多效生因子抗體規(guī)格: 0.1ml

AGPHD1  氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

ULBP2/N2DL2  UL16結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體規(guī)格: 0.1ml

SKALP/Elafin  彈性蛋白酶抑制劑抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)  磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體規(guī)格: 0.1ml

A4GALT/CD77  α1,4-半糖基轉(zhuǎn)移酶1規(guī)格: 0.2ml

phospho-PFKL (Ser775)  磷酸化6磷酸果糖激酶抗體規(guī)格: 0.1ml

LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

ATRIP/TREX1  系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體規(guī)格: 0.2ml

IMPDH1  肌苷單磷酸脫氫酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Stathmin(Ser38)  磷酸化原基因蛋白18抗體規(guī)格: 0.1ml

LY-96/MD-2  MD-2蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-MARCKS (Ser152/156)  磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體規(guī)格: 0.1ml

CO4A2  膠原蛋白4a2亞基抗體規(guī)格: 0.2ml小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

皮革正青霉 Eupenicillium alutaceum

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小角狀節(jié)皮菌 Arthroderma corniculatum

小鼠腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

銅綠假單胞菌 Pseudomnas aeruginose

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

MA-782(小鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

小鼠肥大細(xì)胞細(xì)胞英文名稱：P815

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

弗氏鏈霉菌 Streptomyces fradiae

FaDu(人咽鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌

人腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL