小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

鎂孔雀綠增菌液/鎂孔雀綠湯/RV湯/MM，RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠氣管和支氣管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

沙氏瓊脂培養(yǎng)基/Sabouraud′s Agar用于真菌檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

TRX標(biāo)簽蛋白裂解液100ug20μg、100μg

SW620(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SOB湯/SOB BrothBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞gersion

糖發(fā)酵基礎(chǔ)湯/Bromcersol Purple Broth Base微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，無菌加入各種糖醇類物質(zhì)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

TBS500ml國(guó)產(chǎn)

SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PVDF膜（0.22um）26.5cm × 3.75m,12cm x 20cmgersion

BEL-7405(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MOLT-4全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion

PANC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HuT 78(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：L1210

1% NaC1蔗糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人食管細(xì)胞英文名稱：KYSE450

MRS瓊脂基礎(chǔ)/MRS瓊脂/MRS酸菌瓊脂/MRSA用于食品中酸菌的培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人晶體上細(xì)胞英文名稱：SRA01/04

膽鹽七葉苷瓊脂/Bile Esculin Agar腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

淋巴瘤英文名稱：MJ（懸浮）

鏈球菌培養(yǎng)基1萬毫升/袋國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α （50 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18，19，20-trinor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15-keto-17-phenyl trinor PGF2α； 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α

CAY10572 （5 mg）1，5，6，7-tetrahydro-2-（4-pyridinyl）-4H-pyrrolo[3，2-c]pyridin-4-one； PHA 767491； CAY10572

18-carboxy dinor Leukotriene B4 （250 ug）7R，14S-dihydroxy-4Z，8E，10E，12Z-octadecatetraenedioic acid； 18-carboxy dinor LTB4； 18-carboxy dinor Leukotriene B4

12（R）-HEPE （50 ug）12R-hydroxy-5Z，8Z，10E，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid； 12（R）-HEPE

2-Arachidonoyl Glycerol-d5 （1 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid， 2-glycerol-1，1，2，3，3-d5 ester； 2-AG-d5； 2-Arachidonoyl Glycerol-d5

Carbonate Buffer （1 ea）Sodium Carbonate； Carbonate Buffer

Prostaglandin D2 EIA Standard （1 ea）Prostaglandin D2 EIA Standard

13（S）-HpOTrE（γ） （5 mg）13S-hydroperoxy-6Z，9Z，11E-octadecatrienoic acid； 13（S）-HpOTrE（γ）

Nitrotyrosine EIA Antiserum （500 dtn）Nitrotyrosine EIA Antiserum

Tris-EDTA Stock Solution （10X， pH 7。4） （1 L）TE Buffer； Tris-EDTA Stock Solution （10X， pH 7。4）

Methylcarbamyl PAF C-16 （10 mg）1-O-hexadecyl-2-O-（N-methylcarbamoyl）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； Methylcarbamyl PAF C-16

C-8 Ceramide-1-phosphate （1 mg）N-octanoylsphingosine-1-phosphate； C-8 Ceramide-1-phosphate

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 COX-FA COX Positive Control （1 ea）COX Positive Control； COX-FA COX Positive Control

Latanoprost Lactone Diol （10 mg）（3aR，4R，5R，6aS）-hexahydro-5-hydroxy-4-[（3R）-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one； Latanoprost Lactone Diol

CAY10397 （25 mg）5-[[4-（ethoxycarbonyl）phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic acid； CK47A； CAY10397