小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

小鼠成纖維細(xì)胞英文名稱：L929

運(yùn)動發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

肝細(xì)胞HBV病毒株英文名稱：HEPG2.2.15

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

猴菌 Hericium erinaceus

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

QBC-939, 人膽管細(xì)胞gersion

松口蘑 Tricholoma matsutake

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

玫瑰栗色鏈霉菌 Streptomyces rosecastaneus

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus

小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 7（Z），10（Z），13（Z），16（Z），19（Z）-N-（2-hydroxyethyl）-Docosapentaenamide （5 mg）N-（2-hydroxyethyl）-7Z，10Z，13Z，16Z，19Z-docosapentaenamide； 7（Z），10（Z），13（Z），16（Z），19（Z）-N-（2-hydroxyethyl）-Docosapentaenamide

Fusidic Acid （sodium salt） （1 g）（4α，8α，9β，13α，14β）-16β-（acetyloxy）- 3α，11α-dihydroxy-29-nordammara-17Z（20），24-dien-21-oic acid， monosodium salt； SQ 16，36Fusidic Acid （sodium salt）

AM2201 8-quinolinyl carboxamide （5 mg）1-（5-fluoropentyl）-N-（quinolin-8-yl）-1H-indole-3-carboxamide； AM2201 8-quinolinyl carboxamide

PTIO （100 mg）4，5-dihydro-4，4，5，5-tetramethyl-2-phenyl-3-oxide-1H-imidazol-1-yloxy； α-Phenyltetramethylnitronyl nitroxide； PTIO

Proscillaridin A （10 mg）（3β）-3-[（6-deoxy-α-L-mannopyranosyl）oxy]-14-hydroxy-bufa-4，20，22-trienolide； A-32686|NSC 7521|PSC-801； Proscillaridin A

1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC （1 g）1，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1，2-DSPC|Coatsome MC 8080|1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； 1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC

ML-030 （25 mg）3-（2，5-dimethoxyphenyl）-6-（3，4-dimethoxyphenyl）-7H-1，2，4-triazolo[3，4-b][1，3，4]thiadiazine； CID-11757146； ML-030

FCCP （50 mg）2-[2-[4-（trifluoromethoxy）phenyl]hydrazinylidene]-propanedinitrile； Trifluoromethoxy carbonylcyanide phenylhydrazone； FCCP

BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture （420 wells）BRM bromodomain Ligand/APC Acceptor Mixture

MN-25-2-methyl derivative （5 mg）7-methoxy-2-methyl-1-[2-（4-morpholinyl）ethyl]-N-[（1S，2S，4R）-1，3，3-trimethylbicyclo[2。2。1]hept-2-yl]-1H-indole-3-carboxamide； MN-25-2-methyl derivative

15-epi Prostaglandin A1 （500 ug）15-epi PGA1； 9-oxo-15R-hydroxy-prosta-10,13E-dien-1-oic acid

小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒操作步驟6-Bromoisoquinoline （5 g）NSC 229320； 6-bromo-isoquinoline

HZ52 （25 mg）2-（4-（bipheny-4-ylamino）-6-chloropyrimidiny-2-ylthio）-octanoic acid

（±）11-HEPE （100 ug）（±）-11-hydroxy-5Z，8Z，12E，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid； （±）11-HEPE

14（15）-EET （500 ug）（±）14（15）-epoxy-5Z，8Z，11Z-eicosatrienoic acid； 14（15）-EpETrE； 14（15）-EET