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產品中心

當前位置:首頁產品中心分子生物學試劑核酸擴增50次SP6體外轉錄試劑盒

SP6體外轉錄試劑盒
產品簡介:

SP6體外轉錄試劑盒公司正*的各種產品細胞CaM KII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CaM KII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞CaM KIV激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CaM KIV激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

產品型號:50次

更新時間:2025-10-31

廠商性質:經銷商

訪問量:380

服務熱線

021-39596320

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產品介紹

DNA提取流程圖:

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下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產品規格

貨號

SP6體外轉錄試劑盒

SP6 in vitro   Transcription Kit

50

GOY-F10294

產品詳細介紹:

本試劑盒是基于SP6 RNA聚合酶的RNA體外轉錄試劑盒,它利用含有SP6啟動子的模版DNA,以NTP為底物,從SP6啟動子下游開始合成與模版DNA中一條鏈互補的RNA,簡單快速獲得大量的RNA分子。

產品特點:

即開即用,用戶只需提供含SP6啟動子的DNA模板即可以進行體外轉錄實驗,不需要單獨準備每一個成份。

單溶液預配液,減少加樣次數,避免了操作誤差,增加了可重復性。

模版DNA可以是線性化的質粒DNA,也可以是PCR擴增產物。

可以合成的RNA的佳長度在20nt2000nt之間。

產品配方經過精心優化,每μg DNA模版可以合成26μg RNA

得到的RNA可以用于RNA結構研究、核酶生物化學、體外翻譯、RNA-蛋白質相互作用、反義技術、SELEX技術和RNA干擾(RNAi)等實驗。

保存:-20℃,有效期一年。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
檸檬酸(CA)含量測試盒   可見分光光度法   50/48              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名:苯甲酸利扎曲坦  分子式:C22H25N5O2 

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名:  分子式:C13H22N4O3S  度:98.0%  關鍵詞: 

鎳測試盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名:  分子式:C16H16N4O3  度:98.0%

尿酸含量測試盒   可見分光光度法   50/48              Tropisetron   105826-92-4  中文名:鹽酸托烷司瓊  分子式:C17H21ClN2O2 

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名:O-芐基-L-  分子式:C16H17NO3
戴斯-馬丁氧化劑   Dess-Martin periodinane  質量規格:>95% HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規格:96T/48T

西多福韋  Cidofovir  質量規格:>98%,BR,可用于細胞培養 小鼠基質金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP12 ELISA Kit

4-氨基-5-咪唑甲酰胺  5-Amino-4-imidazolecarboxamide  質量規格:>98%(滴定) 人脂0壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 96T/48T

TNP 470/O-(氯乙酰氨甲酰基)煙曲   AGM-1470   質量規格:≥97% 大鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS-3)試劑盒 Rat suppressors of cytokine signaling 3,SOCS-3 ELISA Kit

牛磺石膽酸鈉(進分)   taurolithocholate  質量規格:≥97%進口分裝 英文名稱RatAndrostenedioneELISAKit大鼠雄烯二同(ASD)規格:96T/48T

甘氨鵝脫氧膽酸  glycochenodeoxycholic acid (GCDCA  質量規格:>97% 果菜纖維素酶解法定量檢測試劑盒10

牛磺豬去氧膽酸鈉   taurohyodeoxycholate hydrate  質量規格:≥98%,美國進口 ELISAKitPDGF-AB人血血小板衍生生長因子AB規格:48T/96T

磺丁基-β-環糊精;磺丁基醚倍他環糊精鈉  Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers,  salts)  質量規格:>99%,USP 小鼠基質金屬蛋白酶10(MMP10)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP10 ELISA Kit

纈氨  Valinomycin  質量規格:>95% (HPLC),進分 人游離原卟啉(FEP)ELISA檢測試劑盒HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 96T/48T

5--13-二甲基吡唑   5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole  質量規格:>98% 大鼠細胞因子信號轉導抑制因子1(SOCS-1)試劑盒 Rat suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit
SP6
體外轉錄試劑盒細胞半胱-8CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒

組織半胱-7CASPASE-7)活性熒光定量檢測試劑盒

細胞半胱-7CASPASE-7)活性熒光定量檢測試劑盒

組織半胱-7CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒

細胞半胱-7CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)


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