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當前位置:首頁產品中心生化試劑盒三羧酸循環系列甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法測試盒

甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法測試盒
產品簡介:

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產品型號:

更新時間:2025-11-06

廠商性質:經銷商

訪問量:403

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產品介紹

產品名稱:甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法測試盒
規格50/48
測試方法可見分光光度法
貨號:GOY-01S6587
分類:三羧酸循環系列
商品介紹:
MCS
廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體基質中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環的調節。

測定原理:

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產生甲基檸檬酰,進一步水解產生甲基檸檬酸;該反應促使無色的DTNB轉變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測定步驟
1
分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2
將試劑一、二、三37(哺乳動物)25(其它物種)預熱10分鐘。
3
加樣表:

圖2.jpg

樣本的前處理
FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
FBP活性計算:
1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應體系總體積,1×10-3 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.1 mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g
EB病毒LMP-2A蛋白抗體     納曲酮抗體IgG

內皮細胞活化蛋白受體抗體     墨蝶蛉還原酶抗體

效應細胞蛋白酶受體1抗體     末端脫氧核苷酸轉移酶抗體

FBXO36 F-box蛋白相關蛋白36抗體     末端多聚腺苷酸2蛋白抗體

表皮生長因子樣蛋白8抗體     末端多聚腺苷酸1蛋白抗體
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細黃鏈霉菌   棒桿菌

肺炎克雷伯菌凍干粉   嗜肺軍團菌

費氏志賀氏菌   溫特曲霉
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