蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號(hào)：GOY-01D68

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：21.2kDa

實(shí)際分子量：20kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asn278~Gly450 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產(chǎn)品名稱：CD26分子(CD26)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產(chǎn)品名稱：CD26分子(CD26)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產(chǎn)品名稱：CD26分子(CD26)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 phospho-ATG4C(Ser166)

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 phospho-ATG4A(Ser100)

磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體 phospho-ATG16A(Ser213)

磷酸化蛋白激酶AKT3抗體 phospho-AKT3 (Ser472)

磷酸化能受體β2抗體 phospho-ADRB2 (Ser261)

磷酸化水通道蛋白2抗體 phospho-AQP2(Ser261)

磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 phospho-ATG3 (Tyr18)

醛縮酶2抗體 ALDOB

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 ANKRD11

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-ABL1+2 (Tyr393+429)

胰腺α抗體 AMY2A

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr53)

基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白大鼠CAL-27(人舌鱗細(xì)胞)雜色曲霉 Aspergillus versicolor

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

酸桿菌屬 Lactobacillus sp.貝葉多孔菌

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii苜蓿中華根瘤菌

普雷恩毛霉 Mucor prainii人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

香菇 Lentinula edodes人食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens片球菌 Pediococcus sp.

人支氣管上皮細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑木耳 Auricularia auricula葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

NIH 3T3/小鼠成纖維細(xì)胞Caki-2(人腎透細(xì)胞細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus