蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白斑馬魚

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)

GL-B; b-GAL; bGAL; ELNR1; EBP; GLB1; Lactase; Elastin Receptor 1,67kDa; Elastin Receptor 1(67kD); Acid Beta-Galactosidase

型號：GOY-01D119

酶與激酶

代謝通路

物種：Danio rerio (Zebrafish，斑馬魚)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1)  產品名稱：N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

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英文名稱：Recombinant Antithrombin (AT)  產品名稱：抗(AT)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

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英文名稱：Recombinant Aromatase (ARO)  產品名稱：芳香酶(ARO)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

BXDC2蛋白抗體 BXDC2

BTB/POZ結構域蛋白19抗體 BTBD19

BOLA1蛋白抗體 BOLA1

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殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 BPIL1

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LA795(小鼠肺腺細胞)總狀毛霉 Mucor racemosus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黃色籃狀菌

SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維蘇云金芽胞桿菌猝倒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. sotto

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

百脈根根瘤菌 Rhizobium loti綠僵菌 Metarhizium sp.

大鼠肝內膽管上皮細胞培養基腺

Hela, 人宮頸細胞系洋蔥青霉 Penicillium alli

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae鏈霉菌 Streptomyces sp.

CSC, 小鼠心肌細胞涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis