英文名稱：RecombinantInterleukin1ReceptorAssociatedKinase4(IRAK4)
NY-REN-64
型號：GOY-01D1894
物種：Rattusnorvegicus(Rat，大鼠)
來源：原核表達
宿主：E.coli
內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：n/a
預測分子量：-
實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：N-terminalHisTag
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液(pH7.4，含有0.01%SKL,1mMDTT,5%Trehalose和Proclin300.)
性狀：凍干粉
純度：>97%
等電點：-
應用：PositiveControl；Immunogen；SDS-PAGE；WB.
規格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：
實體組織蛋白的提取
在每1mL冷LysisBuffer加入10μL磷酸酶抑制劑，1μL蛋白酶抑制劑和5μL100mMPMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1mL冷LysisBuffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5min；
取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量(Bradford法、BCA法)；
分裝保存于-70℃，避免反復凍融。
培養細胞蛋白提取
貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；
懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中，1000轉/分離心10min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5min洗兩次；
在每1mL冷LysisBuffer加入10μL磷酸酶抑制劑，1μL蛋白酶抑制劑和5μL100mMPMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷LysisBuffer。
置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15min；
14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物,蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
分裝保存于-70℃，避免反復凍融。
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更新時間：2025-11-13
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