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猴子膠原酶IELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)禁忌
猴子膠原酶IELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)禁忌:1、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,ELISA試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。2、如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其正確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,推薦使用排槍加樣。4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5、嚴(yán)格按照說明書的操縱進(jìn)行,ELI...
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ELISA試劑盒背景深,全部呈有色原因
ELISA試劑盒背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD1洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留洗液準(zhǔn)確配制;充分洗滌,靜置15秒,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染。2底物污染,未避光保存,出現(xiàn)顏色棄去底物,重新配置3樣品稀釋液污染棄去稀釋液,重新配置4吸頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不*吸頭盡可能一次性使用5不正確的孵育時(shí)間,溫度(尤其是底物孵育的時(shí)間)為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。*按照說明書...
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小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的局限性
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的局限性:①樣本檢測(cè)結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);②樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;③陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;④病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑤不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑥試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果樣本采集、存放及運(yùn)輸:1、費(fèi)用樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法...
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豬TGFβ1elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解
豬TGFβ1elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解:1.細(xì)胞上清:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。2.腦脊液:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100W1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。3.血清血漿:加入50u山樣本分析緩沖液后加50u標(biāo)本如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100u①血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液②血...
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人絨毛膜促性腺激素βelisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)未知抗體的間接法
人絨毛膜促性腺激素βelisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~...
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脲原體通用PCR檢測(cè)試劑盒樣品處理及要求
脲原體通用PCR檢測(cè)試劑盒樣品處理及要求:1.血清:將收集于血清分高管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)4C過夜,然后10009高心20分鐘,取上)清可或?qū)⑸锨逯糜?20C或80℃保存,但應(yīng)免反復(fù)東融2.血:用EDTA成肝素作為抗疑劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8c1000×9離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20C或-80℃保存,但應(yīng)造兔反復(fù)陳3組織勻:用預(yù)令的PBS(0.01M,pH=7.4)中洗組織,去除殘留血液(勻家中裂解的紅細(xì)會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重...
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佛手染料法PCR鑒定試劑盒操作流程
佛手染料法PCR鑒定試劑盒操作流程:1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該...
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小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA 實(shí)驗(yàn)操作步驟
小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別...
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莪術(shù)染料法PCR鑒定試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
莪術(shù)染料法PCR鑒定試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化...
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牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒操作步驟
牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒操作步驟:1,試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。2,實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6,洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。8,嚴(yán)格按照說明書...
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人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體2(NTR2)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體2(NTR2)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸...
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猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。3.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。5.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請(qǐng)避光保存。8.不要用其它的試劑替換試劑盒中的試劑。
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