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技術文章
轉化細胞的新測試
2018
4-12轉化細胞新的測試，稱為"多能測試"（PluriTest），具有收效大、、無需動物展開的多能性測試/特點。使用微陣列技術，能同時對數以千計不同的DNA序列進行分析。斯克里普斯研究小組開創了關于所有基因信息的大型數據庫，這些基因活躍在正常的人體胚胎干細胞、誘導多能干細胞和許多的非多能細胞系中。對于多能測試，這個數據庫對正常多能干細胞系建立了詳細的分子模型。Loring說，與使用小的生物標志檢測細胞的診斷測試不同，分子模型的方法使用了微陣列中的數千條信息。這個診斷測試的結果具有高度...+ -
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裝滿培養液的干細胞如何處理?
2018
4-10很多人都會遇到從其他地方買來干細胞或者快遞運來細胞，裝滿培養基的培養瓶的細胞怎么處理的問題。第1步：先放37℃培養箱放置4小時，這樣細胞在通過長途跋涉以后得以穩定，觀察細胞狀態。第2步：將新鮮培養基和舊的培養基1:1稀釋，如果細胞狀態不好，可以將血清濃度提到15%，否則正常培養，這樣有一個過渡期，不至于細胞換血清之后狀態不佳，15%的血清培養48h之后換成正常濃度培養。細胞胞質疏松，狀態不好，養不起來，怎么辦?策略1：一般情況下，從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度...+ -
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ATCC細胞如何正確分離
2018
4-8ATCC細胞分裂是指細胞分裂為兩個相同副本的過程。普通人的一生中要經歷無數次的這一過程。為了生成兩個*相同的副本，細胞必須地分離它們的染色體，這一事件依賴于稱之為動粒（kinetochore）的專門結構將染色體雙向附著到紡錘體微管上。在細胞分裂的早期階段，動粒結合紡錘體微管會發生許多的錯誤。正常的細胞能夠有效地糾正這些錯誤，確保染色體正確分離。而癌細胞通常不會糾正這些錯誤，使得子細胞染色體數目異常，從而幫助這些癌細胞抵抗化療。達特茅斯Geisel學院生物化學教授Compton...+ -
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ATCC細胞核移植技術
2018
4-3ATCC細胞從2-4月齡成熟母鼠獲得，未成熟支持細胞從0-5日齡未成熟雄鼠獲得。卵丘細胞通過透明質酸酶脫顆粒細胞獲得。未成熟睪支持細胞獲得方法如下：取下的小鼠睪用0.1mg/ml膠原酶與0.01mg/ml脫氧核糖核酸酶37℃處理30min，然后用0.2mg/ml胰蛋白酶37℃處理5min，去睪懸液即可。睪懸液用含4mg/mlBSA的PBS洗一下就可用于顯微注射了。未成熟睪細胞根據其體積與形態即可確認。MII期受體卵母ATCC細胞在37℃條件下去核，操作液為含5µg...+ -
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轉化細胞外源基因導入的原理和操作步驟
2018
3-29轉化細胞實驗試劑1.細胞營養液（DMEM液體培養基，10％胎牛血清，雙抗100單位/ml），消化液（0.05％胰酶，0.53mMEDTA·Na），Hank’s液。2.2×HBS液（280mMNaCl,10mMKCl,1.5mMNaHPO4·2H2O,12mM葡萄糖，50mMHepes，pH7.05,0.2μ過濾除菌），CaCl2（2.5M，0.2μ過濾除菌）溶液，超純水（滅菌）。3.PBS，蛋白酶K，NP40，RNaseA，無水乙醇，酚，DNA上樣緩沖液，瓊脂糖，TAE電泳緩...+ -
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干細胞療法有助于視力恢復
2018
3-27英國兩名“濕性”老年性黃斑變性患者接受胚胎干細胞療法治療，原本幾近失明的眼睛恢復視力，能夠視物、閱讀，為治療這種常見眼疾帶來希望。黃斑是視網膜的重要區域。“濕性”老年性黃斑變性患者的視網膜色素上皮細胞因血管滲漏受損，造成視力模糊不清，嚴重時失明。英國穆爾菲爾德眼科醫院利用人體胚胎干細胞培養出視網膜色素上皮細胞，將它嵌入一個支架中，形成一張40微米厚、6毫米長、4毫米寬的“補丁”。然后，他們把這張活細胞補丁植入患者失明眼睛的黃斑后，替代原來的病變細胞。整個手術耗時兩小時。研究人...+ -
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轉化細胞電融合的原理和方法
2018
3-22轉化細胞實驗目的動物的游離細胞以及植物成微生物去壁后的原生質體，在電刺激下進行細胞融合，且融合率高、無毒性，操作簡便及融合后的細胞繼續培養成活率高等優點，是細胞工程手段的又一進展。實驗原理將制備的游離細胞或原生質體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細胞被極化，成為偶極子，造成細胞之間相互連接，如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用時間過長，則細胞連接成串珠狀，應適當控制以上條件，盡量使兩細胞處于點接觸狀態，然后施加方波脈沖予以刺激，由于電脈沖的瞬間作用...+ -
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轉化細胞修復特定基因
2018
3-20轉化細胞這項研究對于人類健康來說具有重要的意義，而且對于理解腫瘤的發育過程中細胞內部發生的改變十分有用。MMR缺陷將導致細胞變得更具腫瘤特性，這可能是與偶遇MMR缺陷的細胞缺少保護基因以及降低突變風險的相關機制。研究者們目前并沒有向這一方向拓展的想法，但如果有人愿意深入研究的話將是十分有意義的事情。這項研究發現MMR能夠特異性地修復特定基因，而不是對基因組上的非基因位點進行修復。這一發現將極大程度上促進我們對物種利用MMR修復基因突變的理解。“雖然基因對于物種的生物學功能的實...+ -
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干細胞的基因測序
2018
3-13研究人員首先進行了結腸癌干細胞的基因測序，并使用小鼠模型及病人來源腫瘤細胞的3D細胞培養模型進行了功能研究。他們的研究發現腫瘤干細胞的生存由一個特殊的刺猬信號通路（SHH-PTCH1）控制，這個通路允許細胞對外部抑制干細胞分化的信號產生反應。“將靶向抑制刺猬信號通路的療法與其他縮小腫瘤的療法結合，可能會為清除腫瘤干細胞并防止復發提供新策略，”Regan博士說道。相似的靶向刺猬信號通路的研究也在胰腺癌、乳腺癌等模型中取得了令人振奮的結果。“未來的研究將旨在確定該信號通路的下游信...+ -
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轉化細胞增殖生長方面實驗
2018
3-8測定轉化細胞增長數值常用zui簡便的方法。一般過程為1.接種21孔/24孔板細胞（如用培養瓶時則21瓶）。2.分7組，每組3孔（或瓶），培養一周（7天），期間逐日檢測一組，計數。3.把7天中的細胞數值繪成圖，即為細胞生長曲線。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1.懸液制備取待測生長狀態良好細胞，增長至接近匯合時，向培養瓶內加1ml升0.25%胰蛋白酶液，37℃溫箱中消化，至細胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養液、輕吹打制備成細懸液、計數；2.接種向每孔...+ -
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ATCC細胞獲得無限表達所需是試劑
2018
3-6(1)ATCC細胞瞬時表達：通常可以使蛋白在細胞中暫時表達數天到數周。瞬時表達常用于驗證cDNA是否能夠指導蛋白的合成，比較表達同一蛋白的不同載體的有效性，在進行建立穩定轉染的細胞系之前，通過瞬時表達來驗證重組表達載體的正確性是十分必要的。然而，瞬時表達難以按比例產生大量蛋白質(1mg)，此外，整個細胞群體中只有部分細胞暫時得到蛋白表達，不利于細胞表型的研究。(2)穩定表達：通過利用共轉染的標記篩選系統，如G418等，對DNA轉染后的哺乳動物細胞進行選擇，使質粒DNA穩定整合...+ -
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干細胞在人體中有多種組織來源
2018
3-1近年來，科學家發現成人干細胞在人體中有多種組織來源，其中包括胎盤組織。來自Celularity公司的科研人員認為，與其他組織來源的干細胞相比，胎盤干細胞更為重要，胎盤干細胞不僅免疫原性很低，同時還具有免疫調控作用；胎盤干細胞可在直系親屬間使用，對配型的要求低；此外，胎盤干細胞含量豐富，用于治療可能會更加便宜。羅伯特·哈里里是一名工程師、外科醫生和企業家，于1998年開始從事胎盤干細胞的研究工作。他向媒體表示，迄今為止，這家創業公司已經進行了幾次臨床試驗，下一步是嘗試向FDA提...+
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