人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1圖片
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞為穩(wěn)定二倍體細(xì)胞。 
培養(yǎng)條件  F12K  10%FBS
傳代方法  1:4-1:6，每周換液2-3次
傳代情況 P16
凍存條件  90%FBS+10%DMSO
支原體檢測 
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

百萬堿基細(xì)菌 (G-)DNAout    10 次
百萬堿基細(xì)菌 (G+)DNAout    10 次
百萬堿基血液 DNAout    10 次
百萬堿基真菌 DNAout    10 次
百萬堿基植物 DNAout     10 次
半干法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )    20L
半乳糖氧化酶    150U
半纖維素酶    15ku
包涵體大量純化試劑盒    2次
包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝    100 次
包涵體微量純化試劑盒    20 次
包涵體中量純化試劑盒    5次
胞嘧啶    5g
苯酚紅    5g
苯基介質(zhì)    50mL
苯甲基磺    1g
崩潰酶    500mg
鼻腔采樣拭子     50 支
吡啰紅 G    5g
芐瞇鹽酸鹽    5gAB-CHMINACA metabolite M5A （1 mg）1-（（4-hydroxycyclohexyl）methyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid
CBL-018 （10 mg）naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside； 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside
BVT 948 （5 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione
LY2811376（4S）-4-[2,4-difluoro-5-（5-pyrimidinyl）phenyl]-5,6-dihydro-4-methyl-4H-1,3-thiazin-2-amine
Tesaglitazar （5 mg）AZ 242|GalidaTM； （αS）-ethoxy-4-[2-[4-[（methylsulfonyl）oxy]phenyl]ethoxy]-benzenepropanoic acid
Clinafloxacin （hydrochloride） （500 mg）AM1091； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
Rosiglitazone （25 mg）BRL 49653； 5-[[4-[2-（methyl-2-pyridinylamino）ethoxy]phenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Deltarasin （hydrochloride） （5 mg）2-[4-[（2S）-2-（2-phenyl-1H-benzimidazol-1-yl）-2-（4-piperidinyl）ethoxy]phenyl]-1-（phenylmethyl）-1H-benzimidazole, hydrochloride
Difenoxin （hydrochloride） （500 ug）Diphenoxylic Acid|R 15403； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
EC 23 （25 mg）AGN 190205|BASF 46928； 4-[2-（5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl）ethynyl]-benzoic acid
BLT1 Receptor Blocking Peptide （200 ug）BLTR1|LTB4 Receptor 1|Leukotriene B4 Receptor 1
AZD 24614-[[4-fluoro-3-[（4-methoxy-1-piperidinyl）carbonyl]phenyl]methyl]-1（2H）-Phthalazinone
單甲基化組蛋白H3K9多肽Monomethyl Histone H3K9 Peptide （100 ul）
Actinomycin C1， ActinomycinActinomycin D （10 mM）
變色硅膠    50g
冰袋    1個(gè)
丙二醛測試盒 / 脂質(zhì)過氧化物測試盒    50 T
丙酮酸激酶    2mg