人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；GOS-3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞；GOS-3圖片
形態(tài)特性  多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  由U-343MG衍生而來(lái) 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS + 4mM L-Glu
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X，Y； CSF1PO：10，12； D13S317：9，13； D16S539：9，12； D18S51：23； D19S433：11.2，13，14； D21S11：31，33.2； D2S1338：22，24； D3S1358：15，17； D5S818：12，13； D7S820：9，11； D8S1179：13，14； FGA：19，20； TH01：6，9.3； TPOX：8，9； vWA：17，18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

140623-20雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-EGFP·PI）20 次
90602D-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/EcoR I50 次
濕潤(rùn)劑 P-40100mL
丁酰膽堿酯酶500U
溴甲酚紫5g
DNA  HEPES( 羥乙基乙硫磺酸 )100g
CAS103476-89-7亮抑酶肽2mg
130537-10鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液，10mg/mL10mL
柱式海洋動(dòng)物 DNAout50 次
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶10000U
ApaI2000U
微量 DNA 助沉劑0.1mL
柱式探針純化試劑盒10 次
130552-500堿性磷酸酶，偶聯(lián)500U
131042-25miRNA 熒光定量檢測(cè)試劑盒25 次
Vinblastine( 長(zhǎng)春新堿 )100μL
果膠酶100mgTETRAETHYLSILANE四乙基硅烷631-36-7
C.I. Solvent Yellow 90溶劑黃90
AMENTOFLAVONE穗花杉雙黃1617-53-4
ACID GREEN 3酸性綠34680-78-8
NA水質(zhì)氮氧化物（水劑）標(biāo)樣
NA水質(zhì)總磷標(biāo)樣
4-Bromophthalimide4-溴鄰二酰亞胺6941-75-9
Epmedin B羊藿定 B110623-73-9
Loperamide hydrochloride酸洛丁胺34552-83-5
NICKEL(II) SULFATE HEPTAHYDRATE硫酸鎳10101-98-1
Bis[2-(2-benzothiazoly)phenolato]zinc(II)雙[2-(2-并噻唑基)酚]鋅58280-31-2
NA卟啉顯色劑
Hypericin金絲桃素548-04-9
Ethyl methyl carbonate碳酸乙酯623-53-0
2,5-Dimethyl-3-hexyne-2,5-diol2,5-二基-3-己炔-2,5-二醇142-30-3
Isobutyl iodide碘代異丁烷513-38-2
Hexafluorozirconic acid六鋯酸12021-95-3
Isobutyl isobutyrate異丁酸異丁酯97-85-8
3-Amino-4-chlorobenzamide3-氨基-4-酰胺19694-10-1
YTTRIUM NITRATE HEXAHYDRATE酸釔13494-98-9
Molybdenyl acetylacetonate乙酰丙鉬17524-05-9
FLUORIDE STANDARD離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液16984-48-8
D-(+)-TURANOSED(+)-松二糖547-25-1
L- 胱氨酸25g
牛血清白蛋白封堵液250mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬(wàn) )25mg
130527-1哺乳動(dòng)物蛋白酶抑制劑1mL