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當前位置:首頁產品中心ATCC細胞腫瘤細胞Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-555圖片

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-555圖片
產品簡介:

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-555圖片售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

產品型號:

更新時間:2025-10-23

廠商性質:經銷商

訪問量:464

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產品介紹

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-555圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-555圖片
形態特性  上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

磷酸化蛋白純化試劑盒50 次
牛血紅蛋白5g
Taq DNA 聚合酶5000U
*0F' 菌種1mL
90205-500RNase A 干粉500mg
130833-1LAMP 可見光染料1mL
微球菌核酸酶5000U
HMS174(DE3)菌種1mL
甜菜堿鹽酸鹽100g
酸水解酪素100g
CAS68988-92-1瑞氏色素5g
21-0050-5動物上皮細胞生長因子5mL
111201-50痰液 DNAout50 次
RAPD PCR 試劑盒 ( 含銀染 )100 次
DEAE 葡聚糖凝膠 A-2525g
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )5次
Tma 核酸內切酶 III500U
CAS6976-37-0雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷5g
12-268GS200 酵母菌種1mL
一氧化氮合成酶測試盒24 T5-Methoxy-pyridin-3-ylamine3-氨基-5-氧基吡啶64436-92-6
(S)-3-Ami-N-Boc-piperidine(S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基啶625471-18-3
Boric acid酸11113-50-1
(R)-1-CBZ-3-PYRROLIDINOLR-1-芐氧羰基-羥基吡咯100858-33-1
TRANS-8-METHYL-6-NONENOYL CHLORIDE反-8-基-6-壬酰95636-02-5
Weak Acid Red A弱酸性紅A
Calcium鈣標準溶液7440-70-2
METHYL RICINOLEATE蓖麻油酸酯141-24-2
Glyoxylic acid乙酸298-12-4
5-IODO-2-METHYLANILINE5-碘-2-基胺83863-33-6
NA5-腺苷一磷酸二(六水)(AMP)
2',4',6'-TRIMETHYLACETOPHENONE三基乙酰丙1667-01-2
Fmoc-N-methyl-D-valineFmoc-N-基-D-纈氨酸103478-58-6
3-Chloro-2,2-dimethyl-1-propanol3--2,2-二基-1-丙醇13401-56-4
2-Methylhydroquinone基氫醌95-71-6
2-Amino-6-bromopurine2-氨基-6-溴嘌呤82499-03-4
2,4-Dimethylbenzoic acid2,4-二基酸611-01-8
FMOC-L-IsoleucineFmoc-L-異亮氨酸71989-23-6
Palladium diacetate醋酸鈀3375-31-3
ACETYLCHOLINE IODIDE碘化乙酰膽2260-50-6

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