Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-592圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-592圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 C3
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

18-0550-100胎盤堿性磷酸酶檢測試劑盒100 次 
蝦堿性磷酸酶300U
天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶500 U
宿主細(xì)胞系列1mL
131002-10AP 標(biāo)記的抗生物素抗體10μL
PBS 緩沖液 ,10×250mL
鏈霉親和素磁珠2mL
哺乳動物蛋白酶抑制劑1mL
小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗1000μL
120690-10紅霉素溶液 ,100mg/mL10mL
NBD-Cl25mg
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL
CAS8007-47-4加拿大樹膠100mL
CAS107-43-7甜菜堿10g
131200-100細(xì)胞計(jì)數(shù)液 (Vi-CELL 儀 )100 次
山羊抗兔 IgG，熒光素 555 標(biāo)記0.1mg
快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠25mL
CAS25895-60-7硼氫化氰5g
130956-10柱式醬油 DNAout10 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
Catalase( 抗氧化酶 )200mgBLB培養(yǎng)基/BLB Medium雙歧桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：A172
酪胨瓊脂/Peptone From Casein Agar藥品、生物制品無菌試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MKN-28(人胃高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
天狼星紅染色試劑盒規(guī)格：200ml
假單胞分離肉湯/Pseudomonas Isolation Broth假單胞菌群增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CCD-1095Sk(人腺浸潤性導(dǎo)管旁膚細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人小氣道上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PK-15(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Flag標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg
HT混合鹽/HT Media Supplement (50×) Hybri-Max™γ射線滅菌1vailSigmaH0137原裝
牛肉浸膏/牛肉膏/小牛肉浸膏/牛肉抽提物/Meat extracts beefBR500克國產(chǎn)/進(jìn)口
293E(人胚腎細(xì)胞（EBNA1基因修飾）)5×106cells/瓶×2
小鼠胎兒表角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人胚肺成纖維細(xì)胞英文名稱：KMB17
大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元gersion