人子宮頸癌；C-33 A價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。

人子宮頸癌；C-33 A價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  C-33 A 細(xì)胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細(xì)胞株(參見(jiàn)ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 細(xì)胞一開(kāi)始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細(xì)胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P53表達(dá)上調(diào)，且有一個(gè)273位密碼子的點(diǎn)突變導(dǎo)致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 P(98+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:12；D13S317:13；D16S539:13,14；D18S51:15,18；D19S433:11,13,14；D21S11:29,30,31；D2S1338:23,25；D3S1358:16；D5S818:11,12；D7S820:10；D8S1179:10,14；FGA:21,26；TH01:7,8；TPOX:9；vWA:18,20
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
80910-10X-Gal 溶液，20mg/mL10mL
柱式軟體 RNAout50 次
一管式病毒 DNAout50 次
地塞米松100mg
酪蛋白溶液 (PBS)100mL
140646-100魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
SP6 RNA 聚合酶5000U
莽草酸10mg
高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次
丁基硫介質(zhì)50mL
18-0540-120酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒120 次 
細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒30 次
卵白蛋白1g
植物線(xiàn)粒體純化試劑盒 ( 精提 )5次
131001-10AP 標(biāo)記的抗地高抗體10μL
Red-Taq DNA 聚合酶100U1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-6674-22-2
3-(Bromomethyl)-5-chlorobenzo[b]thiophene3-溴基-5-并噻吩1198-51-2
4-Aminobenzaldehyde對(duì)氨基556-18-3
Cynaroside木犀草苷5373/11/5
1-BUTYL-2,3-DIMETHYLIMIDAZOLIUM HEXAFLUOROPHOSPHATE1-丁基-2,3-二基咪唑六磷酸227617-70-1
Solvent Red 27油紅O1320-06-5
4,4'-Diiodobiphenyl4,4-二碘聯(lián)3001-15-8
SECOISOLARICIRESINOL開(kāi)環(huán)異落葉松樹(shù)脂酚29388-59-8
2-Pyridinecarboxaldehyde吡啶-2-1121-60-4
Allyl chloroformate酸丙酯2937-50-0
Stannous sulfate硫酸亞錫7488-55-3
SODIUM NITRATE-15N酸-15N31432-45-8
p-Nitrophenylacetonitrile對(duì)基乙555-21-5
Potassium tert-butanolate叔丁醇鉀865-47-4
o-Phenanthroline monohydrochloride monohydrate鄰菲羅啉酸3829-86-5
Cyclohexanecarboxylic acid chloride環(huán)己酰2719-27-9
N-BenzoylcytidineN-酰胞苷13089-48-0
7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin7-乙基-10-羥基喜樹(shù)86639-52-3
Adenosine腺嘌呤核苷58-61-7
2-Iodoaniline2-碘胺615-43-0
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶 (H-)1000U
博萊溶液 ,10mg/mL1mL
小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗100μL
131234-1地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL
NAO 25mg
非酶 DNA 清除劑 -215 次