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更新時間:2025-10-23
廠商性質:經銷商
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人成巨核細胞白血病細胞;MEG-01圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人成巨核細胞白血病細胞;MEG-01圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 MEG-01細胞株源自一位CML患者成巨核細胞轉換期的骨髓細胞。 細胞質因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反應,α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性。 髓過氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。 用單克隆抗體BA-1(抗B細胞,粒性白細胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細胞,血小板)染色成陽性。 其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
一管式病毒 RNAout50 次
120507-25Xa 因子蛋白酶25μg
遺傳100mg
4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個
X33 酵母菌種1mL
CAS58-58-2嘌呤鹽酸鹽25mg
CAS3483-12-3二硫蘇糖醇 (DTT)5g
81028-25一站式植物 mRNAout25 次
DNA CTAB 溶液,20%100mL
Southern 細菌 (G-)DNAout10 次
81203-20SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )20L
RNA DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL
動物上皮細胞生長因子5mL
D/F12 培養基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
120895-200大鼠白細胞分離液 1.084200mL
天凈沙細胞蛋白質 -RNA 雙提取試劑盒 50 次
交聯瓊脂糖凝膠 6B100mL
嘌呤干粉25mg
23-0240-100Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
81224-100BCIP/NBT 顯色試劑盒100mL
油紅 O5gBenzene in Toluene氣相色譜儀檢定用標準物質(-溶液)
Pepstatin胃蛋白酶抑制劑26305-03-3
5-Acetylamido-2-chloroaniline3-氨基-4-乙酰胺51867-83-5
101 White support101白色擔體
Sodium gluconateD-葡萄糖酸527-07-1
N-BOC-ETHYLENEDIAMINE HYDROCHLORIDEN-BOC-乙酸79513-35-2
Homophthalic acid鄰羧基乙酸89-51-0
6-Aminopyridine-3-carboxamide6-氨基煙酰胺329-89-5
Basic protease性蛋白酶
2'-Chloroacetophenone鄰乙2142-68-9
N-NITROSO-DI-ISO-PROPYLAMINEN-亞基二異丙胺601-77-4
3-Indolepropionic acid吲哚-3-丙酸830-96-6
6-Nitroindole6-基吲哚4769-96-4
2-BROMO-5-IODOBENZOIC ACID2-溴-5-碘酸25252-00-0
2,2'-THENOIN2-羥基-1,2-二(2-噻吩基)乙烷-1-27761-02-0
Methyl L-tyrosina-酪氨酸酯1080-06-4
1,1-Bis(hydroxymethyl)cyclopropane1,1-環丙烷二醇39590-81-3
4-Chloroindole4-吲哚25235-85-2
N-(3-chloropropyl)dibutylamineN-(3-丙基)二正丁胺36421-15-5
96 孔板病毒 DNAout( 真空法 )1次