人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞；RT4圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞；RT4圖片
形態(tài)特性  多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來(lái)源于一名63歲白人男性的移行細(xì)胞乳頭狀瘤，可作為轉(zhuǎn)染宿主。 
培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS
傳代方法  1：2~1:4傳代，每周2~3次。
傳代情況 P(175+5)
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
硫氧還蛋白5mg
131224-250Helly 固定液250 mL
傘形酮5g
#NAME?5g
CAS62610-50-8交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B100mL
60602-50柱式植物 DNAout50 次
石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒50 次
瓊脂糖凝膠 2B100mL
核糖核酸酶 B100mg
核酸外切酶 III2500U
51208B-0.5dNTP 溶液 ,10mM0.5mL
膠原蛋白Ⅰ型1g
口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
穿刺培養(yǎng)基10 管Phenyllithium基鋰591-51-5
2-Iodo-5-(trifluoromethyl)benzyl bromide2-碘-5-三基溴芐702641-06-3
Coptisine chloride化黃連6020-18-4
Ethyl 3-methylvalerate3－基酸乙酯5870-68-8
Carboxyethylgermanium sesquioxide二羧乙基三氧化二鍺12758-40-6
Mandelic acid(R)-(-)-扁桃酸611-71-2
Trazodone hydrochloride酸曲唑25332-39-2
Bis(2-ethylhexyl) phosphate二(2-乙基己基)磷酸酯298-07-7
(R)-(+)-N-Benzyl-1-phenylethylamine(R)-(+)-N-芐基-1-乙胺38235-77-7
1,2-Bis(triethoxysilyl)ethane1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷16068-37-4
Sodium orthovanadate釩酸13721-39-6
1,1,1,3,3-Pentafluoropropane1,1,1,3,3-五丙烷460-73-1
4-Chloro-3-nitrobenzoic acid4--3-基酸96-99-1
2-Chloro-4-nitroaniline2--4-基胺121-87-9
Tetramethylol acetylenediurea四羥基甘脲5395-50-6
1-(4-Chlorophenyl)-3-methyl-2-pyrazolin-5-one1-(4-基)-3-基-2-吡唑啉-5-13024-90-3
N-(tert-Butoxycarbonyl)-O-benzyl-D-threonineBoc-O-芐基-D-蘇氨酸69355-99-3
Hexamethylphosphoramide六磷酰三胺680-31-9
Formylhydrazine酰肼624-84-0
CAS6226-79-5麗春紅 S10g
91204-50動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒50 次
尿苷5g
一管式病毒 DNA-RNAout50 次