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產品型號：10mL
更新時間：2025-10-31
廠商性質：經(jīng)銷商
訪問量：262
服務熱線021-39596320
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下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 貨號 |
超級雜交液(原位雜交) | Super hybrid solution(In situ hybridization) | 10mL | GOY-F10153 |
產品詳細介紹：
本產品為我司開發(fā)的即用型原位雜交專用核酸雜交液。既可以用于RNA原位雜交、DNA原位雜交，也可以用于FISH原位雜交等試驗。 原位雜交是在一定生物結構基礎之上的核酸雜交。這種結構基礎可以是一條染色體；一個細菌；更大結構基礎是細胞和組織。基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，通過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 雙鍵分子，應用帶有標記的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、熒光素、等非放射性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交，然后可用放射自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位雜交技術，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節(jié)機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。 儲存條件：低溫運輸和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程圖：
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式：C37H35N3O7
兔素(Renin)ELISA試劑盒 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名：D-谷5-苯甲酯 分子式：C12H15NO4 度：98.0%
兔素(Renin)ELISAKit 5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名：5-苯甲酰基戊酸 分子式：C12H14O3 度：98.0%
兔素(rabbit Renin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 4-Aminosalicylic acid 中文名：4-氨基水楊酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0%
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名：5-羥甲基糠醛 分子式：C6H6O3 度：%
克螨特標準溶液(1.00mg/ml) Propargite solution 質量規(guī)格：1.00mg/ml 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA檢測試劑盒Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit 96T/48T
三氯殺蟲酯標準溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 大鼠血栓素合成酶(TXAS)試劑盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit
三氯殺蟲酯標準溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質量規(guī)格：100μg/ml,u=2% 英文名稱RatTumornecrosisfactorαELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T
霜霉威(分析標準品,99%) Propamocarb 質量規(guī)格：分析標準品,99% 肝素(heperin)活性比色法定量檢測試劑盒20
解毒喹(標準品) Cloquintocet-mexyl 質量規(guī)格：分析標準品 ELISAKitPCDH1人原鈣黏素1規(guī)格：48T/96T
綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%) Chlortoluron solution 質量規(guī)格：100μg/ml,u=4% 小鼠克拉拉細胞蛋白16(CC16)ELISA試劑盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit
敵草隆(99%) Diuron 質量規(guī)格：0.99 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA檢測試劑盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T
四螨嗪(分析標準品,98.6%) Clofentezine 質量規(guī)格：分析標準品,98.6% 大鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
非草隆(標準品) Fenuron 質量規(guī)格：分析標準品 英文名稱RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格：96T/48T
丁(B9)(標準品) Daminozide 質量規(guī)格：分析標準品 肝素(heperin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒50
超級雜交液(原位雜交)細胞PKD2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞PKCι激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
