DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔干擾素-β(rabbit IFN-β)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Benzyl D-glutamate  中文名：D-谷5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%

兔干擾素-r(rabbit IFN-r)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5-Benzyl D-glutamate  中文名：D-谷5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4 

兔干擾素-a(rabbit IFN-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Benzyl L-glutamate  1676-73-9  中文名：L-谷5-芐酯  分子式：C12H15NO4 

兔肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名：  分子式：C18H27N3O4 

兔分泌型球蛋白Aelisa試劑盒   兔分泌型球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔分泌型球蛋白A試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔分泌型球蛋白A試劑盒、兔分泌型球蛋白A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3
N-硝基-L-精甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester   質(zhì)量規(guī)格：>98% Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  質(zhì)量規(guī)格：>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

AEBSF絲抑制劑  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

AEBSF(進(jìn)分)  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分TCI A2215 小鼠顆粒酶A(GZMA)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit

鹽酸貝他定(進(jìn)口)  Bestatin HCl  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,美國(guó)進(jìn)口 人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T

鄰菲啰啉鹽酸鹽，一水  1,10-Phenanthroline  monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

膦酰二肽鈉  Phosphoramidon di salt  質(zhì)量規(guī)格：0.99 英文名稱RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)規(guī)格：96T/48T

癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

德羅特韋(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitfPSA人游離前列腺特異性抗原規(guī)格：48T/96T

十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖  Dodecyl glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ，英文名： EMAb ELISA Kit
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)細(xì)胞AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織PKC激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞PKC激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織Src激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞Src激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))