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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心分子生物學(xué)試劑探針標(biāo)記及檢測10mg細(xì)胞質(zhì)標(biāo)記染料,長效示蹤C(jī)DCFDA,SE

細(xì)胞質(zhì)標(biāo)記染料,長效示蹤C(jī)DCFDA,SE
產(chǎn)品簡介:

細(xì)胞質(zhì)標(biāo)記染料,長效示蹤C(jī)DCFDA,SE公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)菌羧酸酯酶(carboxylesterase;CE)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)菌多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase;PG)活性比色法定量檢測試劑盒
真菌多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase;PG)活性比色法定量檢測試劑盒
植物多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase;PG)活性比色法定量

產(chǎn)品型號:10mg

更新時(shí)間:2025-10-31

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:358

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產(chǎn)品介紹

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下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

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貨號

細(xì)胞質(zhì)標(biāo)記染料,長效示蹤CDCFDA,SE

5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein   diacetate, succinimidyl ester

10mg

GOY-F10183

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE已被廣泛證實(shí),用CDCFDA 活細(xì)胞綠色熒光探針標(biāo)記細(xì)胞能有效確定總細(xì)胞的數(shù)量和一個(gè)樣本中存在多少活細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合熒光染色法是分析非均質(zhì)細(xì)胞種群的有力工具。

FDA 和它的衍生物無熒光分子進(jìn)入細(xì)胞后被胞內(nèi)無特異性的酯酶所水解產(chǎn)生熒光。這些熒光產(chǎn)物只能積聚在具有完整細(xì)胞膜的細(xì)胞中。因此,死細(xì)胞無完整細(xì)胞膜不能被染色。FDA 具備精確地膜轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)力學(xué)和胞內(nèi)水解作用或者類似物(CDCFDA)相關(guān)的細(xì)胞功能,因此可以通過熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞儀來檢測FDA 標(biāo)記的細(xì)胞。過FDA 熒光標(biāo)記的細(xì)胞在細(xì)胞系或者菌株中存在變化,可能是由于不同胞內(nèi)酯酶的活性所造成的。活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, 琥珀酰亞胺酯是一個(gè)胺化FDA 衍生物,可以用來制備各種FDA偶聯(lián)物。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔白細(xì)胞介素35elisa試劑盒   兔白細(xì)胞介素35試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔白細(xì)胞介素35試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素35試劑盒、兔白細(xì)胞介素35 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  4-Biphenylcarboxylic acid  中文名:4-苯甲酸  分子式:C13H10O2  度:98.0%

兔白細(xì)胞介素-35IL-35ELISA試劑盒     4β-Hydroxywithanolide E  中文名:4β-羥基醉茄內(nèi)酯E  分子式:C28H38O8  度:98.0%

兔白細(xì)胞介素-35IL-35ELISA試劑盒              4β-Hydroxywithanolide E  中文名:4β-羥基醉茄內(nèi)酯E  分子式:C28H38O8 

兔白細(xì)胞介素1elisa試劑盒   兔白細(xì)胞介素1試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔白細(xì)胞介素1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素1試劑盒、兔白細(xì)胞介素1elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     4-Biphenylcarboxylic acid  中文名:4-苯甲酸  分子式:C13H10O2 

兔白細(xì)胞介素15elisa試劑盒   兔白細(xì)胞介素15試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔白細(xì)胞介素15試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔白細(xì)胞介素15試劑盒、兔白細(xì)胞介素15elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  4-Biphenylcarboxylic acid  92-92-2  中文名:4-苯甲酸  分子式:C13H10O2  度:98.0%
D-
核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)  D-(-)-Ribose  質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠乙酰(Ach)ELISA檢測試劑盒Ratacetylcholine,ACHELISAKit 96T/48T

D-核糖  D-(-)-Ribose  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白C(PC)試劑盒 Human Protein C ELISA Kit

二硫蘇糖(DTT)  DL-Dithiothreitol  質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級 RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

D(+)-松二糖  D(+)-Turanose  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR GSK-3ALPHA蛋白共沉淀分析試劑盒5

D-果糖-1,6-二三鈉鹽  D-Fructose 1,6-bisphosphate  salt  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Mousethioredoxieductase,xRELISA試劑盒小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

海帶多糖;昆布糖 (來自褐藻類)  Laminarin from Laminaria digitata  質(zhì)量規(guī)格:BR,日本進(jìn)口分裝 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 ,英文名: PA-IgG/M/A ELISA Kit

(1:250),粉  Pancreatin  質(zhì)量規(guī)格:酶活1:250,BR 大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA檢測試劑盒RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 96T/48T

木瓜蛋白酶(800u/mg)  Papain  質(zhì)量規(guī)格:800u/mg 人蛋白ATP1B4(ATP1B4)試劑盒 Human ATP1B4 ELISA Kit

木瓜蛋白酶(2000u/mg)  Papain  質(zhì)量規(guī)格:2000u/mg;200u/g Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(1:2500)  Pancreatin  質(zhì)量規(guī)格:酶活1:2500,BR GSK-3BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
細(xì)胞質(zhì)標(biāo)記染料,長效示蹤CDCFDA,SE細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細(xì)胞Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細(xì)胞Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

實(shí)驗(yàn)步驟
(1)
實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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