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腫瘤細(xì)胞間相互作用影響iPSc的成熟實(shí)驗(yàn)
腫瘤細(xì)胞經(jīng)典四步法誘導(dǎo)iPSc肝分化從生長(zhǎng)狀態(tài)良好的iPSc中去除分化的細(xì)胞,用胰蛋白酶消化成單細(xì)胞,接種至基質(zhì)膠包被好的細(xì)胞培養(yǎng)皿上,用Duncan的四步法進(jìn)行肝細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化。1材料與方法1.1細(xì)胞培養(yǎng)將iPSc接種在基質(zhì)膠(matrigel)包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿上,用經(jīng)典多能干細(xì)胞無滋養(yǎng)層培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)胞達(dá)70%匯合后,先用4型膠原酶消化,然后機(jī)械切割成小的細(xì)胞團(tuán)塊傳代。1.2誘導(dǎo)iPSc肝分化1.2.1經(jīng)典四步法誘導(dǎo)iPSc肝分化從生長(zhǎng)狀態(tài)良好的iPSc中去除分化的細(xì)胞...
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如何解決干細(xì)胞存活率低的問題?
在解凍凍存干細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題,是什么原因?qū)е拢撛趺催M(jìn)行解決?現(xiàn)在我們大家一起往下看吧。或許能給您的實(shí)驗(yàn)問題的解決找到答案!低存活率出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1.解凍過程中細(xì)胞裂解推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為106至107細(xì)胞/毫升。2.解凍過程中的問題推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充...
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如何讓ATCC細(xì)胞的蛋白合成速度Z大化
在ATCC細(xì)胞一項(xiàng)新的研究中,來自德國(guó)癌癥研究中心、海德堡大學(xué)分子生物學(xué)中心、科隆大學(xué)和美國(guó)賓夕法尼亞州立大學(xué)的研究人員研究了一種在蛋白合成中發(fā)揮著至關(guān)重要作用的分子伴侶(molecularchaperone,也被稱作伴侶蛋白)的作用機(jī)制。他們證實(shí)蛋白合成的速度與分子伴侶Ssb的功能相關(guān)聯(lián)。這種控制合成速度的信息儲(chǔ)存在細(xì)胞的遺傳密碼中,因而確保合成功能性蛋白的效率和度zui大化。相關(guān)研究結(jié)果近期發(fā)表在Cell期刊上,論文標(biāo)題為“ProfilingSsb-NascentChai...
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ATCC細(xì)胞分化特化神經(jīng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)
人類多能ATCC細(xì)胞是目前生物學(xué)領(lǐng)域zui引人注目的話題之一,其原因在于hPSCs可通過改善機(jī)體再生能力,為治療許多疾病提供了一個(gè)潛在的途徑。此外,hPSCs系統(tǒng)也適用于藥物篩選和毒性測(cè)試。通過hPSCs構(gòu)建神經(jīng)發(fā)育模型,為分析神經(jīng)早期發(fā)育,病理進(jìn)程和治療方法開辟了一個(gè)新的通道,威斯康星大學(xué)麥迪遜分校Waisman中心的張素春(Su-ChunZhang)教授發(fā)表綜述,介紹了來源自人類多能干細(xì)胞的特化神經(jīng)細(xì)胞。他指出,hPSCs來源的功能性特化神經(jīng)細(xì)胞亞型具有根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)得來的...
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造血干細(xì)胞讓老年小鼠血液恢復(fù)青春
人體內(nèi)的干細(xì)胞是所有細(xì)胞的起源,而且干細(xì)胞可以無數(shù)次的分裂。當(dāng)干細(xì)胞分裂時(shí),一個(gè)細(xì)胞保留為干細(xì)胞,其它的成熟的干細(xì)胞則轉(zhuǎn)化為人體需要的細(xì)胞,比如血細(xì)胞。“人的衰老過程實(shí)際上是干細(xì)胞超時(shí)變化的結(jié)果”,在瑞典德隆大學(xué)醫(yī)學(xué)院從事干細(xì)胞生物學(xué)研究的博士生及本文主要作者M(jìn)artinWahlestedt解釋道。“這些變化中有一些是不可逆的,比如干細(xì)胞DNA的損害。而有些是逐漸變化的,比如表觀遺傳變異。即使通過許多細(xì)胞分裂來維持,但是它們并不一定是可逆的。正如我們所研究的,當(dāng)干細(xì)胞更新時(shí),...
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如何使ATCC細(xì)胞培養(yǎng)物適應(yīng)培養(yǎng)基?
許多ATCC細(xì)胞系容易適應(yīng)無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基,而對(duì)環(huán)境要求過高的其它細(xì)胞卻難以適應(yīng)變化,這就需要更為專業(yè)的方法來適應(yīng)變化。而根據(jù)細(xì)胞系的特性,有兩種方法可使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法;另一種方法是直接適應(yīng)。連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法。通過一系列的血清還原步驟,使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。這是優(yōu)先選用的方法,且不對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境形成太過惡劣的變化。連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法——方法1使原培養(yǎng)基內(nèi)的細(xì)胞連續(xù)地經(jīng)過以下幾個(gè)階段:階段1:...
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ATCC細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程
一、ATCC細(xì)胞準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。二、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原...
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ATCC細(xì)胞抗衰老功效
ATCC細(xì)胞抗衰的功效:1.煥發(fā)皮膚活力和恢復(fù)容顏健康的皮膚光滑而富有彈性,新陳代謝功能旺盛。2.*新陳代謝功能新陳代謝是人體生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。一提到干細(xì)胞很多人都是一頭霧水,對(duì)于干細(xì)胞,臨床上可以治療多種疾病,對(duì)于美容界,干細(xì)胞抗衰老已經(jīng)成為一種時(shí)尚,那么干細(xì)胞抗衰老有哪些功效?1、煥發(fā)皮膚活力和恢復(fù)容顏健康的皮膚光滑而富有彈性,新陳代謝功能旺盛。新生皮膚細(xì)胞來源與皮膚基礎(chǔ)層的皮膚干細(xì)胞,毛發(fā)的健康生長(zhǎng)也有賴于毛囊里的毛囊干細(xì)胞,而皮膚干細(xì)胞和毛囊干細(xì)胞就來源于血液干細(xì)胞...
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利用生物技術(shù)清除無用的腫瘤細(xì)胞
腫瘤細(xì)胞能發(fā)育成所有類型的細(xì)胞,為再生治療帶來極大希望。然而,通過干細(xì)胞的轉(zhuǎn)化所生成的細(xì)胞類群也經(jīng)常包含少量未分化的干細(xì)胞,這會(huì)引起腫瘤的形成。NatureCommunications上報(bào)告了可提高干細(xì)胞療法安全性的一個(gè)“清除”程序。該方法利用一種只在干細(xì)胞上表達(dá)的細(xì)胞表面蛋白從混合細(xì)胞類群中將未分化的細(xì)胞清除。NissimBenvenisty及其同事發(fā)現(xiàn),“tight-junction蛋白”Claudin-6只見于人多能干細(xì)胞表面上。他們接著提出基于抗體或一種細(xì)菌毒素來識(shí)別...
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞為什么會(huì)衰老?
關(guān)于轉(zhuǎn)化細(xì)胞衰老的機(jī)理具有許多不同的學(xué)說,概括起來主要有差錯(cuò)學(xué)派(Errortheories)和遺傳學(xué)派(Genetic/Programmedtheories)兩大類,前者強(qiáng)調(diào)衰老是由于細(xì)胞中的各種錯(cuò)誤積累引起的,后者強(qiáng)調(diào)衰老是遺傳決定的自然演進(jìn)過程.其實(shí),現(xiàn)在看來兩者是相互統(tǒng)一的。(一)差錯(cuò)學(xué)派細(xì)胞衰老是各種細(xì)胞成分在受到內(nèi)外環(huán)境的損傷作用后,因缺乏完善的修復(fù),使“差錯(cuò)”積累,導(dǎo)致細(xì)胞衰老.根據(jù)對(duì)導(dǎo)致“差錯(cuò)”的主要因子和主導(dǎo)因子的認(rèn)識(shí)不同,可分為不同的學(xué)說,這些學(xué)說各有實(shí)驗(yàn)...
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人胚胎腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法
腫瘤細(xì)胞為了能夠適用于醫(yī)學(xué)移植,人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)需要保持一種“未分化”狀態(tài),即它們沒有變換成其他類型的細(xì)胞。為了確定培養(yǎng)hESCs的方法能使它們保持未分化狀態(tài),也能生長(zhǎng)、增殖和存活,研究人員經(jīng)常使用動(dòng)物來源的血細(xì)胞“飼養(yǎng)層”,通常來自于小鼠(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEFs)。然而,這種方法存在各種污染問題,包括病原體和病毒的傳播。為了避免污染問題,使用作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,他們發(fā)現(xiàn),MBMCs可以取代動(dòng)物來源的飼養(yǎng)系統(tǒng),用于培養(yǎng)人類胚胎干細(xì)胞,并能夠使它們成長(zhǎng)在一個(gè)未分化的...
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怎樣開始腫瘤細(xì)胞重編程
腫瘤細(xì)胞環(huán)境有著超越基因組的影響,正因如此,大規(guī)模“組學(xué)"數(shù)據(jù)將是未來細(xì)胞重編程的一個(gè)重要方面。雖然我們認(rèn)為iPSC和ESC在功能上是相同的,但轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組和表觀基因組水平的深入研究將有助于闡明環(huán)境對(duì)重編程的影響。另外,在單個(gè)細(xì)胞中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)“組學(xué)",將能鑒定那些造成iPSC多能性差異的基礎(chǔ)元件。目前,細(xì)胞重編程領(lǐng)域普遍缺乏定量數(shù)據(jù)。實(shí)際上,文獻(xiàn)中的重編程效率差異,可能更多的是由體細(xì)胞內(nèi)部異質(zhì)性造成的,而不是方法學(xué)上的問題。定量理解這樣的異質(zhì)性,可以幫助我們從細(xì)胞群體中...
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