人非小細胞肺癌細胞；NCI-H524圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人非小細胞肺癌細胞；NCI-H524圖片
形態特性  圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞1982年建系，源自非小細胞肺癌男性患者的轉移淋巴結。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
傳代方法 
傳代情況 P21
凍存條件  基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：12；D16S539：12；D18S51：12，13；D19S433：16；D21S11：29，30；D2S1338：16，17；D3S1358：15；D5S818：12；D7S820：11，12；D8S1179：13，15；FGA：21，22，25；TH01：8，9.3；TPOX：8，10；vWA：14，17；
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 40000100g
81211-250Western 印跡膜洗膜液250mL
130699-3000RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )3000U
牛血清白蛋白5g
Calcein Blue 250mg
非凍型血液 DNA 保存液100mL
茜素紅 S 染色試劑盒100mL
18-0620-100一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 )100 T
100808-1溴化乙錠干粉 (EB)1g
神經氨酸酶檢測試劑盒100 次
DNA 快速連接試劑盒100 次
BCA 法蛋白定量試劑盒500 次
克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫構建試劑盒1套
130645-808- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶80U
100921-25地高標記 dUTP 溶液25μLPhenylmethylsulfonyl fluoride基磺酰329-98-6
2-Methyl-3-buten-2-ol2-基-3-丁-2-醇115-18-4
2-Thioxanthine2-硫代黃嘌呤2487-40-3
Sodium octyl sulfate基硫酸142-31-4
Panaxadiol人參二醇19666-76-3
1-BUTYLPYRIDINIUM HEXAFLUOROPHOSPHATEN-丁基吡啶六磷酸186088-50-6
Desoxycholate Lactos去氧膽酸瓊脂
4-CHLORO-2-FLUOROIODOBENZENE4--2--1-碘6797-79-1
NA對基阱
POLY(ETHYLENE GLYCOL SUCCINATE)聚（1,4-丁二醇丁二酸）酯25569-53-3
2-DI-TERT-BUTYLPHOSPHINO-2',4',6'-TRIISOPROPYLBIPHENYL2 - 二叔丁基膦-2'，4'，6' -三異丙基聯564483-19-8
Tin tetrachloride四化錫7646-78-8
1,1,1,2-TETRACHLOROETHANE1,1,1,2-四乙烷630-20-6
5-CHLORO-2-METHOXYBENZONITRILE5--2-氧基55877-79-7
Di-tert-butyl dicarbonate二碳酸二叔丁酯24424-99-5
3,3'-Dimethoxybenzidine dihydrochloride聯大茴香胺酸20325-40-0
Carnosic acid鼠尾草酸3650--09-7
4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucopyranoside4-基傘形-β-D-葡糖苷18997-57-4
3,4-Difluoronitrobenzene3,4-二基369-34-6
2'-Deoxycytidine-5'-triphosphoric acid disodium salt三磷酸脫氧胞苷102783-51-7
DI-T-BUTYLPHOSPHINE二叔丁基膦819-19-2
NA鳥糞硫酸
Amstat氨環酸1197-18-8
Simvastatin伐他汀79902-63-9
2,5-Dimethylphenol2,5-二基酚95-87-4
Taq 酶抗體250U
碘化丙啶苯10mg
胰酶消化液 ( 含 EDTA)100mL
雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒100 次
131022-0.5鏈霉親和素，AP 標記0.5mL
101005-100即用型易錯 PCR 試劑盒100 次
兔抗雞 IgY，辣根過氧化物酶標記300μL