Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞；MKN-45-Cas9-526說明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  圓形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  建議初始濃度2.0×105 cells/ml，1:3傳代；4~5天１次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：26,26；D13S317：8,11；D16S539：10,10；D18S51：16,16；D19S433：14,16.2；D21S11：31,31；D2S1338：18,18；D3S1358：15,16；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：10,11；D8S1179：13,17；FGA：19,24；Penta E：10,10；TH01：7,7；TPOX：8,8；vWA：19,19；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。胰蛋白酶干粉50g
膠原酶Ⅲ型100mg
玫瑰紅鹽5g
山羊抗小鼠 IgG，藻紅蛋白標(biāo)記0.1mg
CAS553-24-2中性紅5g
130581-1000小鼠抗 mCherry 標(biāo)簽單抗1000μL
植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次
L- 賴氨酸鹽酸鹽25g
魚藤酮1g
柱式微生物基因組 DNAout 50 次
CAS65099-79-8交聯(lián)瓊脂糖凝膠 2B100mL
81204-10SDS-PAGE 上樣液，5×10mL
柱式植物 RNAout50 次
硫酸慶大霉素溶液 ,15mg/mL2mLEC 1.1.1.28乳酸脫氫酶9028-36-8
HEPTADECANOIC ACID十七碳酸506-12-7
1-Methyl-2-phenylindole1-基-2-基吲哚3558-24-5
4'-AMINOPROPIOPHENONE4-胺基丙70-69-9
(S)-(+)-1,2-Propanediol(S)-(+)-1,2-丙二醇4254-15-3
2-FLUORO-4-(TRIFLUOROMETHYL)BENZYLAMINE2--4-三基芐胺239087-05-9
Z-LYS(BOC)-OHZ-丁氧羰基賴氨酸2389-60-8
N-[(Trimethylsilyl)methyl]benzylamineN-[(三基硅)基]芐胺53215-95-5
6-METHOXY-2-METHYLBENZOTHIAZOLE6-氧基-2-基并噻唑2941-72-2
ETHYL 3-METHYL-4-OXOCROTONATE3-酰基-2-丁酸乙酯62054-49-3
NA樹蘭浸膏
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonylfluoride hydrochloride4-(2-氨乙基)磺酰酸30827-99-7
Lithium aluminium hydride氫化鋁鋰16853-85-3
Eleutheroside E刺五加甙 E39432-56-9
NUTRIENT BROTH NO. 4, FOR MICROBIOLOGY營(yíng)養(yǎng)肉湯
Capillarisin茵陳色原56365-38-9
(1S,2S)-(-)-1,2-DIAMINOCYCLOHEXANE-N,N'-BIS(2'-DIPHENYLPHOSPHINOBENZOYL)(S,S)-DACH-基特羅斯特配體169689-05-8
Naphthalene萘91-20-3
Valeraldehyde正110-62-3
DNA 酶，Ⅱ型80U
CuZn/Mn-SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (WST 法 )100 次
CAS9001-05-2過氧化氫酶10mL
131146-100山羊抗人 IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μL
3071-50血液 RNAout 50 次
木瓜蛋白酶抑制劑溶液，0.5 mg/mL10mL
4- 氯 -1- 萘酚5g