人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞p53 mRNA陽性，致瘤性陽性。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3~1:8，每周換液2次
傳代情況 P18
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L
Okadaic acid 鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg
凝血酶1000U
T4 RNA 連接酶1000U
51208B-5dNTP 溶液 ,10mM5mL
膠原酶Ⅰ型100mg
卵巢上皮細胞生長因子5mL
CAS7240-90-65- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
CAS8002-43-5卵磷脂 ( 蛋黃 )10g
90613-25動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次
尿苷 -5'- 二磷酸25mg
柱式糞便 DNAout50 次
CAS9007-34-5膠原蛋白Ⅰ型1g
柱式藻類 RNAout50 次
糞便 DNAout100 次
DNA 稀釋液10mLHEL(人紅白細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
5%糖發酵管BR20支國產/進口
硫檸膽蔗瓊脂培養基/TCBS瓊脂/TCBS Agar用于霍亂、副溶弧菌的分離培養250克國產/進口
LLC-WRC 256(大鼠腹水細胞)5×106cells/瓶×2
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
胎兒真成纖維細胞*培養基100mL
MKTTN肉湯/MKTTN Broth食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌250克國產/進口
人成骨肉瘤細胞英文名稱：MG-63
葡萄糖銨發酵管BR20支國產/進口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml、18ml國產
Calu-6(人肺退行性細胞)5×106cells/瓶×2
Jurkat全細胞裂解液100μg國產
RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞gersion
改良CAMP-BAP氏瓊脂基礎/改良CAMP-BAP氏培養基基礎/CAMP-BAP Agar Base Modified彎曲桿菌選擇性分離培養250克國產/進口
大鼠神經小膠質細胞*培養基100mL
S180/小鼠腹水瘤株國產
Hela S3(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養基(配套靛基質)/MUG培養基/MUG-Medium（with Kovacs）大腸埃希氏菌快速熒光測定培養基20g+靛基質20m國產/進口
亮綠糖培養基/Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗250克國產/進口
MCF 7B(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
人肺癌細胞(大細胞肺癌)；NCI-H460圖片中性紅染色液(活細胞染色用)規格：100ml
聚乙二醇 8000250g
CAS76-05-1三氟100mL
130951-10Southern 細菌 (G+)DNAout10 次
EcoRV1500U
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記100μL