人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（人膀胱癌細(xì)胞污染）；ECV-304價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（人膀胱癌細(xì)胞污染）；ECV-304價格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 
生長特性 懸浮生長
特征特性  原以為該細(xì)胞是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，但后來發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞被人膀胱癌細(xì)胞污染。 
培養(yǎng)條件   
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:12；D13S317:12；D16S539:9；D18S51:16,18；D21S11:29；D3S1358:16；D5S818:10；D7S820:10,11；D8S1179:14；FGA:17,22；PentaD:11,15；PentaE:7,10；TH01:6；TPOX:8,11；vWA:17
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

130661-1000RecA 蛋白1000μg 
100210-0.5dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL
JF1125 菌種1mL
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 )250 T
18-0030-50ATP 酶測試盒 ( 組織及細(xì)胞膜需高速離心 )50 T
無 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL300U
Denhardt 溶液，50×100mL
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白10mg
一站式 RNA 電泳套裝10 次
CAS54-62-6氨基喋呤5mg
質(zhì)譜兼容型蛋白銀染試劑盒10 次
Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL
E-64 蛋白酶抑制劑，20mg/mL10mL腺腺/阿霉素耐藥株英文名稱：MCF-7/Adr
膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞
HCT-8全細(xì)胞裂解液100ug100ug
7.5%氯化鈉肉湯/7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口
氯化鎂孔雀綠增菌液/氯化鎂孔雀綠肉湯/RV肉湯/MM，RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
KATO III(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株英文名稱：CHO-K1
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
大鼠腺上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人晶狀體上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
抗生素Ⅰ號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/Antibiotic Agar 磺卞青霉素等的效價測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腸靜脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
RAG(小鼠腎腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠腎小管上細(xì)胞gersion
F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞英文名稱：N-H
130569-30GAPDH 小鼠單抗30μL
131066-10磷酸化蛋白富集試劑盒10 次
130929-10百萬堿基動物 DNAout10 次
刀豆蛋白 A IV25mg
生物素化的堿性磷酸酶 (AP)1mg
140596-100兔抗山羊 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記100 μL
Southern 細(xì)菌 (G-)DNAout10 次
8- 羥基喹啉硫酸鹽5g